Anti-ATF4 coniglio pAb per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P18848

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'ATF4

• ATF4, noto anche come CREB-2 o TaxREB67, è un membro della famiglia di fattori di trascrizione ATF/CREB e svolge ruoli fondamentali nell'adattamento allo stress cellulare e nei processi metabolici normali.
• Agisce come fattore di trascrizione principale della risposta integrata allo stress (ISR), venendo indotto a livello traduzionale upon fosforilazione di EIF2S1 durante lo stress del RE, privazione di amminoacidi, stress mitocondriale o stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:31023583, PMID:32132707
• Regola l'omeostasi metabolica attivando geni coinvolti nella sintesi di amminoacidi (es. ASNS), equilibrio redox e funzione mitocondriale, e può promuovere la sopravvivenza cellulare o, quando associato a DDIT3/CHOP, innescare l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:11960987, PMID:18940792, PMID:15775988
• È coinvolto nello sviluppo osseo migliorando la differenziazione degli osteoblasti e la sintesi del collagene di tipo I, in parte attraverso la fosforilazione da parte di RPS6KA3/RSK2. Riferimenti correlati: PMID:15109498
• Esibisce una localizzazione subcellulare diffusa, principalmente nel nucleo ma rilevato anche nel citoplasma, nella membrana cellulare e nel centrosoma.
• Soggetto a varie modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, idrossilazione e ubiquitinazione, che modulano la sua attività e stabilità.
• Contribuisce alla regolazione del ritmo circadiano attivando periodicamente l'espressione di PER2 e SLC6A4.
• Interagisce con DISC1 nei neuroni per regolare la plasticità sinaptica e la memoria a lungo termine; lega anche l'elemento enhancer responsivo al Tax di HTLV-I. Riferimenti correlati: PMID:31444471

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 260–351) dell'ATF4 umano, suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce un epitopo in questo dominio; considerare l'allineamento delle sequenze quando si valuta la reattività crociata con altre specie.
• L'espressione di ATF4 è altamente indotta in condizioni di stress; per la rilevazione a bassa abbondanza, pre-trattare le cellule con induttori di stress del RE (es. tunicamicina o tapsigargina) o con mezzo di privazione di amminoacidi per potenziare il segnale.
• Questo anticorpo policlonale può rilevare ATF4 a ~39 kDa; notare che ATF4 può subire degradazione rapida, quindi includere inibitori delle proteasi ed evitare cicli di congelamento/scongelamento dei lisati.
• Per immunochimica o immunofluorescenza, possono essere osservati pattern di colorazione nucleare e citoplasmatica; validare l'intensità della fluorescenza in campioni trattati con stress rispetto a quelli non trattati.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, la coerenza tra lotti e le diluizioni di lavoro ottimali dovrebbero essere determinate empiricamente per ogni applicazione e tipo di campione.

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