Anticorpo policlonale coniglio Anti-ATF6 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P18850

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATF6

• ATF6 alfa (fattore di trascrizione dipendente da AMP ciclico ATF-6 alfa) è sintetizzato come precursore integrato nella membrana del reticolo endoplasmatico (RE); in seguito a stress del RE, subisce una proteolisi intramembranare regolata che rilascia il dominio attivo del fattore di trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11779464
• Il fattore di trascrizione processato si trasloca nel nucleo e si lega agli elementi di risposta al stress del RE (ERSE: 5'-CCAAT-N9-CCAC[GA]-3' e ERSE II: 5'-ATTGG-N-CCACG-3') in cooperazione con NF-Y per attivare i geni bersaglio della UPR. Riferimenti correlati: PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11163209, PMID:11779464
• ATF6 può anche partecipare alla trascrizione dipendente dal fattore di risposta al siero ed è coinvolto nello sviluppo della fovea e nella funzione dei fotorecettori coni nella retina. Riferimenti correlati: PMID:26029869
• Subcellularmente, ATF6 cicla tra la membrana del RE, la membrana dell'apparato di Golgi e il nucleo a seconda dello stato di attivazione.
• È espresso ubiquitariamente in tutti i tessuti umani.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di legami isopeptidici e coniugazione ubiquitinica, con molteplici siti di fosforilazione su serina/treonina.
• Processi biologici chiave: attivatore, legame al DNA, stress del reticolo endoplasmatico, risposta alle proteine unfolded.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 190–300 di ATF6 umano, un segmento all'interno del dominio funzionale N-terminale. Questo design può favorire la rilevazione della forma del fattore di trascrizione; si raccomanda comunque una validazione in condizioni di stress del RE (es. trattamento con tunicamicina o tapsigargina).
• Nel western blot (WB), l'anticorpo può rilevare bande corrispondenti a ATF6 a lunghezza completa (~90–100 kDa) o alla forma attiva clivata (~50 kDa) a seconda dello stato di stress del RE cellulare. Ottimizzare la preparazione del campione e includere controlli appropriati.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), considerare il recupero dell'antigene indotto dal calore e testare l'anticorpo a diverse diluizioni nelle sezioni di tessuto bersaglio.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), la permeabilizzazione è obbligatoria; dopo induzione della UPR sono attesi pattern di colorazione sia nel RE che nel nucleo.

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