Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ATG12 per WB, ELISA - O94817

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATG12

• ATG12 è una proteina simile all'ubiquitina essenziale per la formazione delle vescicole autofagiche. Si coniuga con ATG5 attraverso un sistema simile all'ubiquitina che coinvolge ATG7 (simile a E1) e ATG10 (simile a E2), e il coniugato ATG12-ATG5 agisce come un enzima simile a E3 per la lipidazione di ATG8 e l'associazione alla membrana (Per similarità).
• Il complesso ATG12-ATG5-ATG16L1 recluta LRRK2 ai lisosomi stressati, inducendo l'attività chinasica di LRRK2 in risposta allo stress lisosomiale (Per similarità).
• ATG12 può agire come fattore provirale: in associazione con ATG5, regola negativamente l'immunità antivirale innata compromettendo la produzione di IFN di tipo I in seguito a infezione da VSV. Riferimenti correlati: PMID:17709747
• È necessario per la traduzione dell'RNA del virus dell'epatite C (HCV) in ingresso per avviare la replicazione, ma non per il mantenimento una volta che l'infezione è stabilita. Riferimenti correlati: PMID:19666601
• ATG12 si localizza nel citoplasma e nelle membrane delle strutture preautofagosomiali, in linea con il suo ruolo nella formazione dell'autofagosoma.
• La proteina è espressa in modo ubiquitario nei tessuti umani.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e formazione di legami isopeptidici come parte della via di coniugazione Ubl.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 41-140 di ATG12 umano, che può riconoscere sia ATG12 libero che il coniugato ATG12-ATG5. Considerare questo aspetto nell'interpretazione dei risultati nei saggi relativi all'autofagia.
• Per il Western blot, validare la rilevazione intorno a 15 kDa (o 55-60 kDa per il coniugato) in lisati cellulari umani e di topo. Utilizzare controlli appropriati per l'induzione dell'autofagia (es. carenza nutrizionale o stress lisosomiale).
• Per l'ELISA, il rivestimento con il peptide immunogeno o la proteina ATG12 ricombinante può migliorare le prestazioni del saggio. Valutare la reattività crociata con ATG5 e altre proteine simili all'ubiquitina se la specificità è critica.

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