Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-ATG12 per WB, IHC-P, IP, ELISA - O94817

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATG12

• ATG12 (proteina 12 correlata all'autofagia) è una proteina simile all'ubiquitina appartenente alla famiglia correlata all'autofagia (ATG), essenziale per la formazione dell'autofagosoma.
• Viene coniugata ad ATG5 tramite un sistema di coniugazione simile all'ubiquitina che coinvolge ATG7 (simile a E1) e ATG10 (simile a E2), formando un coniugato ATG12-ATG5 che agisce come un enzima simile a E3 per la lipidazione della famiglia ATG8, un passaggio critico nell'espansione della membrana dell'autofagosoma.
• Il coniugato ATG12-ATG5, in complesso con ATG16L1, è necessario per il reclutamento di LRRK2 ai lisosomi stressati e per l'induzione dell'attività chinasica di LRRK2 in condizioni di stress lisosomiale.
• ATG12 è localizzata nel citoplasma e nella membrana della struttura preautofagosomiale.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione e la formazione di un legame isopeptidico durante la coniugazione; lo splicing alternativo genera più isoforme.
• ATG12 svolge un ruolo nelle interazioni ospite-virus: agisce come fattore provirale per il virus dell'epatite C (HCV) supportando la traduzione dell'RNA virale in entrata e regola negativamente la risposta immunitaria antivirale innata contro il virus della stomatite vescicolare (VSV) compromettendo la produzione di interferone di tipo I. Riferimenti correlati: PMID:17709747, PMID:19666601
• L'espressione tissutale è ubiquitaria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) di ATG12 umano, che può riconoscere sia ATG12 non coniugato (15 kDa) che il coniugato ATG12-ATG5 (~55 kDa). Per il Western blot, considerare l'uso di condizioni riducenti per distinguere tra queste forme.
• Per IHC-P, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; validare in tessuto noto per esprimere ATG12 (espressione ubiquitaria, ma condizioni di upregolazione dell'autofagia possono potenziare la colorazione).
• Per IP, l'anticorpo è adatto per catturare complessi nativi di ATG12; assicurare condizioni di lisi adeguate per preservare le interazioni proteiche.
• Le applicazioni ELISA possono essere sviluppate utilizzando questo anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento; testare la reattività crociata con ATG12 murino se necessario.

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