Anticorpo Policlonale Anti-ATG14 per WB, IF/ICC, ELISA - Q6ZNE5

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATG14

• ATG14 (noto anche come Atg14L o Barkor) è un regolatore chiave dell'autofagia necessario sia per l'autofagia basale che indotta. Funziona come parte del complesso PI3-chinasi specifico per l'autofagia PI3KC3-C1, determinandone la localizzazione. Riferimenti correlati: PMID:18843052, PMID:19050071
• ATG14 promuove la formazione dell'autofagosoma e la coniugazione di MAP1LC3/LC3 alla fosfatidiletanolammina, un passaggio critico nell'elongazione dell'autofagosoma. Riferimenti correlati: PMID:19270696, PMID:20713597
• ATG14 promuove la traslocazione di BECN1 dalla rete trans-Golgi agli autofagosomi. Riferimenti correlati: PMID:20713597
• ATG14 potenzia l'attività di PIK3C3 in modo dipendente da BECN1.
• ATG14 è essenziale per la fosforilazione di BECN1 dipendente dall'autofagia e stimola la fosforilazione di BECN1 mentre sopprime la fosforilazione di PIK3C3 mediata da AMPK. Riferimenti correlati: PMID:23878393
• Si lega al complesso t-SNARE STX17-SNAP29 sugli autofagosomi e lo predispone per l'interazione con VAMP8, promuovendo la fusione autofagosoma-endolisosoma. Riferimenti correlati: PMID:25686604, PMID:37632749
• ATG14 si localizza nel citoplasma, nella membrana del reticolo endoplasmatico, nella membrana della struttura preautofagosomiale e nella membrana dell'autofagosoma, riflettendo i suoi ruoli nella biogenesi e maturazione dell'autofagosoma.
• ATG14 è una proteina a struttura coiled-coil che subisce splicing alternativo; è fosforilata e ubiquitinata, come indicato da studi di proteomica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 340–440) di ATG14 umano, che è conservata tra le specie, supportando la reattività incrociata con topo e ratto. Validare nel sistema di campioni rilevante.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda a circa 55 kDa; considerare l'uso di lisati cellulari totali o frazioni subcellulari per esperimenti di induzione dell'autofagia.
• I protocolli IF/ICC dovrebbero includere la permeabilizzazione per rilevare ATG14 localizzato sulla membrana degli autofagosomi e altri compartimenti; si raccomandano controlli negativi e positivi appropriati.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'ottimizzazione della concentrazione dell'antigene di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo; includere una curva standard per la valutazione quantitativa.

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