Anticorpo policlonale Anti-ATG2A per WB, ELISA - Q2TAZ0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATG2A

• La proteina 2 omologa A correlata all'autofagia (ATG2A), nota anche come BLTP4A, è una grande proteina di trasferimento lipidico essenziale per la formazione degli autofagosomi. Collega la membrana di isolamento (IM) al reticolo endoplasmatico (RE) e trasferisce direttamente i fosfolipidi dal RE all'IM per l'espansione della membrana. Riferimenti correlati: PMID:28561066, PMID:30952800, PMID:31271352
• ATG2A si lega al sito di uscita dal RE (ERES) ed estrae i fosfolipidi, consegnandoli successivamente ad ATG9 (ATG9A o ATG9B) sulla membrana autofagosomale in espansione. La sua attività di trasferimento lipidico è fortemente potenziata da WIPI1 e WDR45/WIPI4, che promuovono l'associazione di ATG2A con membrane ricche di fosfatidilinositolo 3-monofosfato (PI3P). Riferimenti correlati: PMID:30952800, PMID:31271352
• Al di là dell'autofagia, ATG2A regola la morfologia e la distribuzione intracellulare delle gocce lipidiche, collegandola al metabolismo e all'immagazzinamento dei lipidi. Riferimenti correlati: PMID:22219374, PMID:28561066
• Subcellularmente, ATG2A si localizza sulla membrana della struttura preautofagosomiale, sulla membrana del RE e sulle gocce lipidiche, in linea con il suo ruolo nei siti di contatto tra membrane.
• La proteina è soggetta a fosforilazione e splicing alternativo, come indicato dalla sua inclusione nei dataset di proteomica fosforilata e dalle previsioni di molteplici isoforme (Parole chiave UniProt: Fosfoproteina, Splicing alternativo).
• Con un peso molecolare di circa 213 kDa, ATG2A è un membro della famiglia ATG2 delle proteine dell'autofagia, che sono mediatori conservati dell'espansione della membrana durante la biogenesi degli autofagosomi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato da una regione interna (aa 700–800) dell'ATG2A umano, il che suggerisce che l'anticorpo può riconoscere sia le isoforme full-length che quelle troncate che contengono questa sequenza.
• In Western blot è prevista una banda prominente vicino a 213 kDa; tuttavia, a causa delle grandi dimensioni della proteina, assicurarsi di utilizzare condizioni di trasferimento adeguate (ad esempio, gel a bassa percentuale, tempi di blotting prolungati) e utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati.
• L'ELISA può essere utilizzato per il test del titolo e l'analisi semiquantitativa; prendere in considerazione l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento corrispondente diretto contro un epitopo non sovrapposto.
• La reattività incrociata è annotata solo per l'uomo; se necessario, la reattività con altre specie deve essere verificata sperimentalmente.
• Le diluizioni di lavoro ottimali sia per WB che per ELISA devono essere determinate empiricamente utilizzando il sistema di campioni biologici pertinente (ad esempio, linee cellulari umane note per esprimere ATG2A).

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