Anticorpo Policlonale Anti-ATG4B per WB, ELISA - Q9Y4P1

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATG4B

• ATG4B, noto anche come Autofagina-1 o APG4B, è una cisteina proteasi che svolge un duplice ruolo nell'autofagia, mediando l'attivazione proteolitica e la delipidazione delle proteine della famiglia ATG8. Riferimenti correlati: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• È richiesto per la macroautofagia canonica, l'autofagia non canonica e la mitofagia, evidenziando il suo ruolo centrale nelle vie di degradazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:33773106, PMID:33909989

• ATG4B cliva specificamente l'amminoacido C-terminale delle proteine ATG8 (MAP1LC3A/B/C, GABARAP, GABARAPL1/2) per esporre un residuo di glicina necessario per la coniugazione alla fosfatidiletanolammina (PE) e l'inserimento nella membrana. Riferimenti correlati: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• Oltre alla lavorazione proteolitica, ATG4B agisce anche come un enzima simile a deubiquitinante per rimuovere ATG8 dalle proteine coniugate (ATG8ilazione), come ATG3, e catalizza la delipidazione delle proteine ATG8 coniugate a PE durante l'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:31315929, PMID:33773106, PMID:15187094, PMID:19322194, PMID:28633005

• Tra i paraloghi di ATG4 (ATG4A-D), ATG4B è l'isoforma principale per l'attivazione proteolitica delle proteine ATG8, ma presenta un'attività di delipidazione più debole rispetto alle altre. Riferimenti correlati: PMID:29458288, PMID:30661429

• Nella mitofagia, ATG4B può promuovere la crescita del fagoforo indipendentemente dalla sua attività enzimatica e dalla coniugazione di ATG8, regolando il traffico di ATG9A e facilitando i contatti tra il fagoforo e il reticolo endoplasmatico. Riferimenti correlati: PMID:33773106

• ATG4B si localizza prevalentemente nel citoplasma, con associazioni riportate agli autofagosomi, al reticolo endoplasmatico e ai mitocondri, in linea con le sue funzioni nell'autofagia e nella mitofagia.

• Le modifiche post-traduzionali di ATG4B includono acetilazione, fosforilazione e S-nitrosilazione, che possono regolare la sua attività e stabilità.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1–393 di ATG4B umano; l'anticorpo ottenuto può riconoscere ATG4B full-length e possibilmente isoforme generate da splicing alternativo. Validare la specificità nel tipo di campione previsto.
• Per Western blotting, attendersi una banda a circa 44 kDa in condizioni riducenti. A causa di possibili modifiche post-traduzionali o clivaggi, possono apparire bande aggiuntive; confermare con controlli appropriati.
• L'espressione di ATG4B è ubiquitaria ma può variare; considerare l'uso di un controllo positivo come lisati cellulari di HeLa o HEK293 e verificare il knockdown se necessario.
• Questo prodotto è qualificato per ELISA; ottimizzare la concentrazione di coating e le condizioni di rilevazione in base al formato del saggio.

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