Anticorpo Monoclonale Anti-ATG4B Coniglio per WB, IF, ELISA - Q9Y4P1

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATG4B

• ATG4B (noto anche come APG4B, AUTL1, autophagin-1) è una cisteina proteasi chiave che regola l'autofagia mediando il processamento proteolitico e la delipidazione delle proteine della famiglia ATG8, essenziali per la macroautofagia, l'autofagia non canonica e la mitofagia. Riferimenti correlati: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651, PMID:33773106, PMID:33909989

• Cleava gli amminoacidi C-terminali degli omologhi di ATG8 (MAP1LC3A/B/C, GABARAP, GABARAPL1/2) per esporre una glicina conservata, prerequisito per la loro coniugazione alla fosfatidiletanolammina (PE) e l'inserimento nelle membrane autofagosomiali. Riferimenti correlati: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• ATG4B agisce anche come enzima delipidante, deconiugando la PE dalle proteine ATG8 per facilitarne il riciclo; inoltre processa le proteine ATG8 su strutture a membrana singola durante l'autofagia non canonica. Riferimenti correlati: PMID:15187094, PMID:19322194, PMID:29458288, PMID:33909989

• Nella mitofagia, ATG4B promuove la crescita del fagoforo indipendentemente dalla sua attività proteasica, regolando il traffico di ATG9A verso i mitocondri e consentendo i contatti ER-fagoforo per il trasferimento lipidico. Riferimenti correlati: PMID:33773106

• Tra i quattro paraloghi di ATG4 nei mammiferi (ATG4A–D), ATG4B è la principale proteasi per l'attivazione di ATG8, ma mostra un'attività di delipidazione relativamente debole rispetto ad ATG4A e ATG4D. Riferimenti correlati: PMID:29458288, PMID:30661429

• A livello subcellulare, ATG4B si localizza nel citoplasma, citosol, autofagosomi, reticolo endoplasmatico e mitocondri, in linea con il suo ruolo multifacciale nell'autofagia e nelle vie correlate.

• Sono state riportate modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione, S-nitrosilazione e glicazione, che potrebbero regolare la sua attività enzimatica e la distribuzione subcellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide all'interno dei residui 200-300 di ATG4B umano, una regione situata nel dominio catalitico. La reattività dell'anticorpo può essere influenzata da modificazioni post-traduzionali o stati conformazionali.
• Per il Western blotting, ATG4B migra a circa 44 kDa. I livelli endogeni possono variare; considerare l'uso di induttori dell'autofagia (es. digiuno, rapamicina) per migliorare il rilevamento.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza, ATG4B mostra una distribuzione citoplasmatica punteggiata che può collocalizzare con marcatori degli autofagosomi (es. LC3) e marcatori mitocondriali in condizioni di mitofagia. Validare la specificità in linee cellulari knockout.
• È stato riportato che l'anticorpo reagisce in modo crociato con ATG4B di topo e ratto; tuttavia, l'allineamento della sequenza della regione immunogena dovrebbe essere verificato per altre specie.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per la quantificazione; considerare un formato ELISA sandwich con una coppia di anticorpi abbinati.

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