Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-ATG5 per WB, IHC-P, ELISA - Q9H1Y0

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATG5

• ATG5 è una proteina centrale dell'autofagia che si coniuga con ATG12 per formare un complesso enzimatico simile a E3, essenziale per la lipidazione della famiglia ATG8 e la formazione dell'autofagosoma.
• Oltre all'autofagia, ATG5 partecipa al controllo di qualità mitocondriale, allo sviluppo e sopravvivenza dei linfociti, alla presentazione dell'antigene di classe II del MHC, al mantenimento dell'assone, alla differenziazione degli adipociti e alla ciliogenesi primaria.
• ATG5 si localizza nel citoplasma e nelle membrane della struttura preautofagosomiale, in linea con il suo ruolo nella formazione delle vescicole autofagiche.
• È espresso ubiquitariamente a livello di mRNA, ma la proteina è drammaticamente sovraregolata nelle cellule apoptotiche, dove media la morte cellulare dipendente da caspasi.
• Nell'apoptosi, ATG5 interagisce con FADD ed è necessario per la morte cellulare autofagica indotta da IFN-gamma.
• Nelle infezioni virali, ATG5 può agire come fattore provirale: è necessario per la traduzione dell'RNA virale dell'epatite C (HCV) in ingresso e regola negativamente le risposte immunitarie antivirali innate tramite la via dell'IFN di tipo I. Riferimenti correlati: PMID:17709747 PMID:19666601
• ATG5 subisce modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e la formazione di un legame isopeptidico durante la coniugazione con ATG12, che è critica per la sua funzione autofagica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 28-275 dell'ATG5 umano, una regione coinvolta nella coniugazione con ATG12; confermare che l'anticorpo rilevi sia le forme non coniugate che quelle coniugate, se necessario.
• Per il Western blot, attendersi una banda a circa 32 kDa in lisati di tessuti umani, di topo o di ratto; includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Per l'IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo per ogni tipo di tessuto, poiché i livelli di espressione di ATG5 possono variare tra tessuti e condizioni apoptotiche.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere condizioni di rivestimento attente; considerare l'uso della proteina ATG5 ricombinante come standard.

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