Anticorpo policlonale di coniglio anti-ATG7 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O95352

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ATG7

• ATG7 è un enzima attivante simile a E1 essenziale per due sistemi di coniugazione di tipo ubiquitina che guidano l'autofagia e il trasporto dal citoplasma al vacuolo (Cvt).
• Attiva ATG12 per la coniugazione con ATG5 e prepara le proteine della famiglia ATG8 (come LC3) per la lipidazione con fosfatidiletanolammina, un passaggio critico per l'associazione alla membrana dell'autofagosoma.
• ATG7 facilita la conversione di LC3-I in LC3-II lipidato sulle membrane autofagosomiche, un marcatore chiave del flusso autofagico. Riferimenti correlati: PMID:34161705
• Oltre all'autofagia canonica, ATG7 è necessario per la mitofagia, contribuendo a mantenere l'omeostasi mitocondriale e a prevenire l'eccessiva produzione di specie reattive dell'ossigeno (ROS).
• Modula l'attività di p53/TP53 per influenzare il ciclo cellulare e la sopravvivenza sotto stress metabolico, e partecipa a processi come l'omeostasi assonale, il mantenimento delle cellule staminali ematopoietiche, la formazione dei granuli delle cellule di Paneth e la differenziazione adiposa.
• ATG7 contribuisce anche alla regolazione del ritmo circadiano mediando la degradazione autofagica del repressore dell'orologio CRY1, collegando l'autofagia all'orologio epatico e al metabolismo del glucosio.
• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma e nelle strutture pre-autofagosomiche, dove orchestra gli eventi di coniugazione correlati all'autofagia.
• ATG7 è ampiamente espresso, con i livelli più alti osservati in rene, fegato, linfonodi e midollo osseo.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 500–676 dell'ATG7 umano, una regione vicino al C-terminale ben conservata tra i mammiferi. Questo design può contribuire alla reattività crociata con l'ATG7 di topo e ratto.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda intorno ai 78 kDa; si consiglia di caricare una quantità adeguata di proteine e ottimizzare le condizioni di trasferimento per catturare la proteina a lunghezza intera.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), la colorazione di ATG7 può apparire diffusa nel citoplasma con un potenziale arricchimento puntiforme presso le strutture pre-autofagosomiche in condizioni di induzione dell'autofagia. Validare con marcatori di autofagia (es. LC3) nel tessuto o modello cellulare pertinente.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevamento; tuttavia, per prestazioni ottimali, si consiglia l'abbinamento con un anticorpo adatto e l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento.
• Dato il ruolo centrale di ATG7 nell'autofagia, questo anticorpo può essere utile per monitorare il flusso autofagico, la mitofagia e i percorsi correlati. Includere sempre controlli appropriati (es. inibitori dell'autofagia come la clorochina) per garantire la specificità per la degradazione autofagica.

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