Anticorpo Monoclonale Anti-ATM per WB, IHC-P, ELISA - Q13315

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'ATM

• ATM (Ataxia telangiectasia mutated) è una proteina chinasi serina/treonina codificata dal gene ATM, appartenente alla famiglia di chinasi PIKK coinvolta nella segnalazione del danno al DNA.
• Funziona come sensore primario delle rotture a doppia elica del DNA (DSB) e dello stress genotossico, come le radiazioni ionizzanti e la luce ultravioletta A. Riconosce e fosforila le proteine substrato sul motivo consenso [ST]-Q per avviare la segnalazione dei checkpoint, l'apoptosi e la riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365
• Fosforila numerosi effettori a valle, inclusi l'istone H2AX (a Ser-139), CHEK2, p53/TP53, BRCA1 e FANCD2, coordinando così l'arresto del ciclo cellulare e le vie di riparazione del danno al DNA. Riferimenti correlati: PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669
• Si localizza nel nucleo, dove media principalmente la segnalazione del danno al DNA, ma risiede anche nelle vescicole citoplasmatiche, nei centrosomi e nei perossisomi, riflettendo i suoi diversi ruoli cellulari.
• Ampiamente espresso nei tessuti umani, con rilevazione nel pancreas, rene, muscolo scheletrico, fegato, polmone, placenta, cervello, cuore, milza, timo, testicolo, ovaio, intestino tenue, colon e leucociti.
• Regola la pessofagia fosforilando PEX5 nei perossisomi in risposta alle specie reattive dell'ossigeno, mirandolo per l'ubiquitinazione e la degradazione. Riferimenti correlati: PMID:26344566
• Funzioni aggiuntive includono l'applicazione dell'esclusione allelica durante lo sviluppo delle cellule B, il controllo della degradazione dell'mRNA istonico dipendente dalla replicazione e l'agire come un potenziale soppressore tumorale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 2619–2939 dell'ATM umana, situati nella regione C-terminale. Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando controlli appropriati, specialmente quando si mirano isoforme o varianti di splicing.
• Per il Western blot, l'ATM migra a circa 351 kDa. Utilizzare gel di poliacrilamide a bassa percentuale (es. 6–8%) e tempi di trasferimento prolungati per garantire un trasferimento efficiente di questa grande proteina.
• Nella IHC-P, ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) e la concentrazione dell'anticorpo primario. Considerare l'uso di tessuti con alta espressione di ATM, come il testicolo o il pancreas, come controlli positivi.
• È riportata la reattività crociata con il mouse; se si utilizzano modelli murini, confermare la idoneità testando in sistemi rilevanti di knockout o knockdown.
• Come anticorpo monoclonale, offre alta specificità. Includere sia controlli biologici positivi che negativi (es. linee cellulari competenti per ATM e deficienti per ATM) per verificare l'identità della banda.

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