Anticorpo policlonale monoclonale anti-ATM coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - Q13315

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'ATM

• ATM, o Ataxia telangiectasia mutated, è una chinasi proteica serina/treonina che agisce come sensore del danno del DNA, riconoscendo le rotture a doppia elica (DSBs) e attivando la segnalazione dei checkpoint in risposta a stress genotossici come le radiazioni ionizzanti e la luce ultravioletta A (PubMed:10550055, PubMed:10839545, PubMed:10910365). Riferimenti correlati: PMID:10550055 PMID:10839545 PMID:10910365
• La chinasi fosforila gli effettori a valle contenenti il motivo di consenso [ST]-Q, inclusa l'istone H2AX alla Ser-139, p53/TP53, CHEK2, BRCA1, MRE11 e molti altri, coordinando così la riparazione del DNA, l'arresto del ciclo cellulare e l'apoptosi (PubMed:10550055, PubMed:10766245, PubMed:10802669). Riferimenti correlati: PMID:10550055 PMID:10766245 PMID:10802669
• ATM svolge un ruolo chiave nel controllo del ciclo cellulare ed è considerato un soppressore tumorale, con mutazioni nel gene ATM collegate all'ataxia-telangiectasia, una sindrome caratterizzata da neurodegenerazione, immunodeficienza e predisposizione al cancro.
• A livello subcellulare, ATM è principalmente nucleare ma si localizza anche nelle vescicole citoplasmatiche, al centrosoma e ai perossisomi. In risposta alle specie reattive dell'ossigeno (ROS), si transloca ai perossisomi e fosforila PEX5 per indurre la pessofagia (PubMed:26344566). Riferimenti correlati: PMID:26344566
• ATM è ampiamente espresso nei tessuti inclusi pancreas, rene, muscolo scheletrico, fegato, polmone, placenta, cervello, cuore, milza, timo, testicolo, ovaio, intestino tenue, colon e leucociti.
• La proteina subisce fosforilazione su più residui in seguito al danno del DNA, essenziale per la sua attivazione e il successivo targeting dei substrati.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 2320–2566 nella regione C-terminale dell'ATM. Si prevede che questo anticorpo riconosca la proteina a lunghezza intera (351 kDa) e possa reagire con isoforme contenenti questo epitopo; convalidare nel sistema di campione pertinente.
• Per il western blotting, utilizzare una percentuale di gel appropriata e condizioni di trasferimento (es. trasferimento umido con tempo prolungato) per eseguire il blot in modo efficiente di questa proteina ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, ottimizzare la fissazione e la permeabilizzazione per rilevare l'ATM nei compartimenti nucleari e citoplasmatici; considerare l'uso di trattamenti noti che inducono danno del DNA per valutare i cambiamenti di localizzazione.
• Per l'ELISA, impiegare un buffer di rivestimento affidabile e convalidare la compatibilità della coppia di anticorpi se utilizzata in un saggio a sandwich.

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