Anticorpo policlonale anti-ATOX1 di coniglio per WB, ELISA - O00244

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATOX1

• ATOX1, noto anche come HAH1 o ATX1, è una proteina di trasporto del rame che lega e fornisce rame citosolico alle proteine ATPasi del rame, svolgendo un ruolo critico nell'omeostasi e nella distribuzione intracellulare del rame.
• Funziona come chaperone del rame, facilitando il trasferimento sicuro degli ioni rame alle proteine bersaglio, prevenendo così la tossicità del rame garantendo al contempo un apporto sufficiente per i processi enzimatici.
• ATOX1 può contribuire ai meccanismi di difesa antiossidante cellulare, potenzialmente modulando l'attività degli enzimi antiossidanti dipendenti dal rame.
• La proteina è espressa in modo ubiquitario nei tessuti umani, indicando un ruolo fondamentale nel metabolismo del rame in vari tipi cellulari.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività, localizzazione o interazione con i partner.
• Il suo peso molecolare è di circa 7 kDa (74 amminoacidi, 7402 Da) e la sua struttura tridimensionale è stata risolta, rivelando residui chiave coinvolti nel legame e nel trasferimento del rame.
• Come parte della via di trasporto del rame, ATOX1 interagisce direttamente con i domini di legame dei metalli N-terminali delle ATPasi di trasporto del rame (ATP7A e ATP7B), essenziali per l'efflusso del rame.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-68 di ATOX1 umano, che comprende il dominio di legame del rame. Quando si valuta la reattività crociata con altre specie o isoforme, verificare la conservazione della sequenza in questa regione.
• Per il Western blotting, la dimensione della banda attesa è di circa 7 kDa. Utilizzare gel ad alta concentrazione (es. 15% o gel a gradiente) e tempi di trasferimento brevi per evitare la perdita di piccole proteine. Includere un marcatore proteico pre-colorato a basso intervallo.
• Nelle applicazioni ELISA, assicurarsi che l'antigene di rivestimento contenga la sequenza dell'immunogeno per massimizzare la sensibilità di rilevamento. Considerare l'uso di ATOX1 ricombinante o del peptide immunogeno come controllo positivo.
• Verificare la specificità dell'anticorpo nel proprio sistema modello utilizzando knockdown con siRNA, knockout CRISPR o lisati di sovraespressione, poiché potrebbero apparire bande non specifiche in alcuni tipi cellulari.
• ATOX1 umano è espresso in modo ubiquitario, quindi comuni linee cellulari (es. HeLa, HEK293T) possono servire come controlli positivi. Per i campioni di tessuto, fegato e rene mostrano tipicamente un'espressione moderata.
• L'anticorpo è confermato per reagire con ATOX1 umano. La reattività crociata con ATOX1 di topo o ratto non è stata testata; allineare la sequenza dell'immunogeno con gli ortologi se è richiesta la rilevazione multi-specie.

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