Anticorpo policlonale anti-ATP1A4 per WB e ELISA - Q13733

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATP1A4

• ATP1A4 codifica la subunità catalitica alfa-4 specifica dello spermatozoo della Na+/K+-ATPasi, una pompa ionica transmembrana che accoppia l'idrolisi dell'AT allo scambio di 3 Na+ verso l'esterno e 2 K+ verso l'interno della cellula. Riferimenti correlati: PMID:16861705
• Questa isoforma ATP1A4 è essenziale per la motilità degli spermatozoi, la capacitazione e la fertilità maschile mantenendo i gradienti ionici necessari per la funzione flagellare e la segnalazione cellulare (Per similarità).
• La proteina è un componente integrale della membrana cellulare, coerente con il suo ruolo di trasportore ATPasi di tipo P, e contiene almeno un'elica transmembrana e un dominio di legame dell'ATP (Parole chiave).
• L'espressione di ATP1A4 è altamente limitata al testicolo, con la proteina rilevata ad alti livelli negli spermatozoi maturi e solo mRNA tracciale trovato nel muscolo scheletrico. Riferimenti correlati: PMID:16175638, PMID:16861705
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e la proteina richiede Mg2+ per la sua attività enzimatica, legando l'ATP e i cationi trasportati Na+ e K+ (Parole chiave).
• Lo splicing alternativo di ATP1A4 produce multiple isoforme, che possono mostrare una regolazione specifica dei tessuti o dello sviluppo (Parole chiave).
• Il gene ATP1A4 appartiene alla famiglia ATP1A delle subunità alfa della sodio/potassio ATPasi, che include anche forme ubiquitariamente espresse come ATP1A1.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aminoacidi 1-90) di ATP1A4 umano, suggerendo che l'anticorpo potrebbe riconoscere preferenzialmente l'N-termino della proteina a lunghezza intera; considerare questo durante la progettazione di saggi di blocco dell'epitopo o di competizione.
• Per il Western blotting, è prevista una banda a circa 114 kDa nei campioni di testicolo o spermatozoi maturi; validare l'anticorpo nel sistema di campione pertinente (es. lisati di testicolo umano, murino o di ratto) a causa della reattività incrociata riportata.
• Quando si utilizza l'ELISA, l'anticorpo può essere impiegato per la cattura o la rilevazione dell'antigene; eseguire titrazioni a scacchiera standard per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali per il formato del saggio specifico.
• Dato l'espressione limitata di ATP1A4, assicurarsi di includere campioni di controllo negativi (es. tessuto non testicolare o linee cellulari) per confermare la specificità.
• L'anticorpo è fornito come policlonale di coniglio, che può presentare variabilità da lotto a lotto; è consigliabile riservare un lotto di riferimento per studi di riproducibilità a lungo termine.

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