Anticorpo Monoclonale Anti-ATP2B1 per WB, IF/ICC, ELISA - P20020

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATP2B1

• ATP2B1 (PMCA1) è una pompa del calcio di tipo P che accoppia l'idrolisi dell'ATP all'estrusione del calcio, cruciale per mantenere i livelli citoplasmatici di calcio a riposo. Riferimenti correlati: PMID:35358416
• PMCA1 regola la pressione sanguigna controllando il calcio intracellulare e la produzione di ossido nitrico nelle cellule muscolari lisce vascolari, influenzando la vasocostrizione.
• Nell'osso, PMCA1 promuove la mineralizzazione facilitando l'assorbimento intestinale del calcio e svolge un duplice ruolo nella differenziazione/sopravvivenza degli osteoclasti tramite oscillazioni ed estrusione del calcio.
• PMCA1 modula la sensibilità all'insulina attraverso l'attivazione dipendente da calcio/calmodulina di AKT1 e NOS3 nelle cellule endoteliali. Riferimenti correlati: PMID:29104511
• Può anche contribuire alla trasmissione sinaptica regolando la dinamica del calcio e dei protoni a livello delle vescicole presinaptiche.
• La proteina si localizza sulla membrana plasmatica, sulla membrana basolaterale e sulle membrane delle vescicole sinaptiche, riflettendo compartimenti funzionali diversi.
• Isoforme multiple (B, C, D, K) mostrano espressione tessuto-specifica: l'isoforma B è ubiquitaria, C nel cervello/cuore/muscolo scheletrico, D nel muscolo fetale, K nell'intestino/fegato e nell'epitelio endometriale.
• ATP2B1 è soggetta a modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, e contiene domini per il legame dell'ATP, il trasporto del calcio e la regolazione della calmodulina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il western blot, attendersi una banda specifica intorno a 135 kDa in condizioni riducenti; considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari che esprimono PMCA1.
• Quando si esegue immunofluorescenza/immunocitochimica, notare i pattern di colorazione attesi per la membrana plasmatica e vescicolare; potrebbe essere necessaria la permeabilizzazione per la rilevazione di epitopi intracellulari.
• Per applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo in un formato sandwich standard o indiretto utilizzando una proteina ricombinante o un peptide pertinente per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• Validare l'anticorpo in campioni umani, di topo o di ratto, considerando che la sequenza dell'immunogeno (aa 5-103) è conservata in queste specie.

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