Anticorpo policlonale coniglio anti-ATP2B2 per WB, ELISA - Q01814

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATP2B2

• ATP2B2 codifica per l'ATPasi 2 di trasporto del calcio della membrana plasmatica (PMCA2), una pompa ATPasi di tipo P che utilizza l'idrolisi dell'ATP per esportare il Ca2+ citosolico attraverso la membrana plasmatica, essenziale per il mantenimento di bassi livelli di calcio intracellulare. Riferimenti correlati: PMID:15829536, PMID:17234811
• PMCA2 è caratterizzata da un'attivazione rapida e un'elevata velocità di clearance del Ca2+, rendendola critica per la dinamica rapida del calcio nei neuroni, in particolare alla sinapsi fibra parallela-cellula di Purkinje dove media l'efflusso presinaptico di Ca2+ e contribuisce all'induzione della depressione a lungo termine e all'apprendimento motorio.
• Nell'orecchio interno, PMCA2 svolge un ruolo essenziale nell'udito e nell'equilibrio trasportando il Ca2+ dagli stereociglia all'endolinfa nelle cellule ciliate cocleari, dissipando i transienti di Ca2+ indotti dalla meccanotrasduzione e regolando la formazione degli otoconi nel sistema vestibolare. Riferimenti correlati: PMID:15829536, PMID:17234811
• La proteina si localizza alla membrana plasmatica, specificamente alle sinapsi, nonché ai domini della membrana apicale e basolaterale in vari tipi cellulari, coerente con il suo ruolo nel trasporto polarizzato del calcio.
• Specificità tissutale: PMCA2 è espressa prevalentemente nella corteccia cerebrale, con livelli inferiori nel muscolo scheletrico, cuore, stomaco, fegato, rene e polmone. Esistono multiple isoforme tramite splicing alternativo, con alcune che contengono i segmenti B, X, W, A o Z, mostrando una distribuzione dipendente dal tessuto.
• Motivi strutturali e funzionali chiave includono dieci eliche transmembrana, un dominio di legame dell'ATP, un dominio di legame della calmodulina e siti di fosforilazione; lega ioni magnesio e calcio, e le mutazioni in ATP2B2 sono associate alla sordità non sindromica (DFNA82).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aminoacidi 1-80) di ATP2B2 umano, che è probabile riconosca multiple isoforme contenenti questo segmento. Confermare la specificità dell'isoforma nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blot, è prevista una banda a circa 137 kDa; considerare l'uso di inibitori delle proteasi e condizioni di lisi lievi per preservare l'integrità delle proteine di membrana.
• Questo anticorpo policlonale è adatto per ELISA; potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo per ottenere il miglior rapporto segnale-rumore.
• È riportata la reattività incrociata con topo e ratto, rendendolo adatto per modelli roditori; validare nel tessuto o linea cellulare rilevante per confermare la reattività.

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