Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ATP4B (idrogeno potassio ATPasi beta) per IHC-P, ELISA - P51164

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATP4B

• Codificata dal gene ATP4B, la proteina nota come subunità beta dell'ATPasi di trasporto del potassio (denominata anche subunità beta dell'H(+)/K(+)-ATPasi gastrica o catena beta della pompa protonica) è la subunità regolatoria beta della pompa H⁺/K⁺-ATPasi gastrica.
• Come componente centrale della pompa protonica gastrica eterodimerica, facilita lo scambio elettroneutro del K⁺ luminale con l'H⁺ citoplasmatico attraverso la membrana apicale delle cellule parietali, accoppiando direttamente la traslocazione ionica all'idrolisi dell'ATP da parte della subunità catalitica alfa.
• La subunità beta svolge ruoli strutturali e regolatori essenziali: è necessaria per l'assemblaggio stabile del complesso alfa/beta e per dirigere la pompa attiva verso la membrana cellulare apicale.
• Meccanisticamente, ATP4B interagisce con il dominio di fosforilazione della subunità alfa e agisce come un cricchetto, stabilizzando la conformazione E2 rivolta verso l'esterno e prevenendo la reazione di trasporto inversa.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente a livello della membrana plasmatica apicale delle cellule parietali gastriche, coerentemente con la sua funzione nella secrezione acida.
• Le caratteristiche post-traduzionali chiave includono la glicosilazione N-linked e la presenza di ponti disolfuro conservati, fondamentali per il corretto ripiegamento e la stabilità; la proteina matura contiene un'unica elica transmembrana e una sequenza segnale-ancora.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato come un peptide sintetico che copre i residui 192-291 dell'ATP4B umana, una regione prevista come accessibile sul lato extracellulare della membrana; ciò potrebbe favorire il rilevamento della proteina nativa in IHC-P.
• Per l'IHC-P su tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina, si consiglia di utilizzare sezioni di mucosa gastrica come controllo positivo; potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione del recupero dell'antigene.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può riconoscere epitopi lineari all'interno della regione dell'immunogeno; le condizioni di rivestimento della piastra e le fasi di blocco dovrebbero essere testate per ridurre al minimo il background.
• Data la reattività crociata riportata con topo e ratto, l'anticorpo può essere valutato in tessuti gastrici di roditori, sebbene la conservazione dell'epitopo debba essere confermata.
• Le condizioni sperimentali dovrebbero essere sempre convalidate nel sistema di campioni pertinente e dovrebbero essere inclusi controlli isotipici appropriati per valutare la specificità del saggio.

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