Anticorpo policlonale coniglio anti-ATP5C1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P36542

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'ATP5C1

• ATP5C1 (subunità gamma dell'ATP sintasi F1) è una subunità critica dell'ATP sintasi mitocondriale F1F0 (Complesso V), l'enzima responsabile della sintesi di ATP da ADP e fosfato inorganico utilizzando la forza motrice del gradiente protonico attraverso la membrana mitocondriale interna. Riferimenti correlati: PMID:37244256
• Questa proteina esiste come due isoforme principali: l'isoforma Cuore, prevalentemente espressa nel muscolo cardiaco e scheletrico, e l'isoforma Fegato, espressa nel cervello, fegato, rene, pelle, intestino, stomaco e aorta, riflettendo le richieste energetiche specifiche del tessuto.
• Come subunità gamma del peduncolo centrale, ATP5C1 accoppia la rotazione guidata dal flusso di protoni nel dominio di membrana F0 ai cambiamenti conformazionali nella testa catalitica F1, consentendo la sintesi di ATP. Svolge anche un ruolo indispensabile nell'assemblaggio del nucleo catalitico F1, come evidenziato dalla sua necessità per la formazione di un intermedio chiave dell'assemblaggio F1. Riferimenti correlati: PMID:29499186
• ATP5C1 è localizzato sulla membrana interna mitocondriale e contiene un peptide di transito N-terminale che ne dirige l'importazione mitocondriale. È soggetto a modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività o assemblaggio.
• Il peso molecolare previsto dell'ATP5C1 è di circa 33 kDa (32996 Da in base a UniProt), il che è coerente con la banda osservata nel Western blot.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 26-298 dell'ATP5C1 umano (NP_001001973.1), che copre la maggior parte della proteina matura dopo la clivaggio del peptide di transito mitocondriale; pertanto, ci si aspetta che l'anticorpo rilevi la forma endogena matura (circa 33 kDa) nel Western blot.
• Per le applicazioni di Western blot (WB), considerare l'utilizzo di lisati proteici arricchiti di mitocondri da linee cellulari o tessuti (come cuore, muscolo scheletrico o fegato) che esprimono ATP5C1, e includere marcatori di peso molecolare appropriati per confermare la banda a 33 kDa.
• Quando si applica questo anticorpo in immunochimica (IHC) o immunofluorescenza (IF), un segnale forte può essere osservato nei tessuti con alto contenuto mitocondriale, come cuore e muscolo scheletrico; la colorazione simultanea con marcatori mitocondriali può aiutare a verificare la localizzazione.
• Si riporta che l'anticorpo reagisce con ATP5C1 umano, murino e ratto; tuttavia, a causa di potenziali differenze di sequenza tra le specie, è consigliabile convalidare la reattività crociata nel sistema di campione pertinente prima di esperimenti su larga scala.
• Per le applicazioni ELISA e IF/ICC, si consiglia di eseguire una titolazione per determinare la diluizione di lavoro ottimale per il tipo di campione specifico e le condizioni sperimentali.

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