Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ATP6AP1 per WB, IHC-P, ELISA - Q15904

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATP6AP1

• ATP6AP1 (subunità S1 della pompa protonica V-tipo), nota anche come Ac45, XAP-3 o ATP6S1, è una subunità accessoria del complesso V0 della vacuolare H+-ATPasi (V-ATPasi). Questo enzima multisubunità accoppia l'idrolisi dell'ATP da parte del complesso V1 alla traslocazione di protoni da parte del complesso V0, guidando l'acidificazione dei compartimenti intracellulari. Riferimenti correlati: PMID:28296633 PMID:33065002
• Oltre all'acidificazione, il complesso V-ATPasi agisce come attivatore lisosomiale di mTORC1 promuovendo l'attività del fattore di scambio nucleotidico (GEF) del complesso Ragulator, facilitando così il reclutamento di mTORC1. Riferimenti correlati: PMID:22053050
• ATP6AP1 guida la V-ATPasi in compartimenti subcellulari specializzati, come le vescicole secretorie neuroendocrine e il bordo irregolare degli osteoclasti, regolandone l'attività. Partecipa anche al traffico di membrana e alla fusione di membrana dipendente da Ca²⁺. Riferimenti correlati: PMID:27231034
• In condizioni aerobiche, ATP6AP1 contribuisce all'omeostasi intracellulare del ferro, innescando l'attività degli enzimi proliil idrossilasi (PHD) del Fe²⁺, portando all'idrossilazione di HIF1A e alla successiva degradazione proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:28296633
• La proteina si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico, nel compartimento intermedio ER-Golgi e in varie vescicole citoplasmatiche, incluse vescicole secretorie, sinaptiche e rivestite di clatrina.
• Ampiamente espressa, con i livelli più alti nel cervello e i più bassi nel fegato e nel duodeno, in linea con i suoi ruoli nella secrezione regolata e nel traffico intracellulare.
• Le mutazioni in ATP6AP1 sono associate a disturbi congeniti della glicosilazione (CDG), sottolineandone l'importanza nella lavorazione delle glicoproteine.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (peptide N-terminale, aa 1–100) è diretto contro una regione conservata nell'uomo e nel topo, supportando la reattività crociata. Validare in sistemi di campioni rilevanti utilizzando controlli positivi (ad es., lisato di tessuto cerebrale) dove l'espressione è alta.
• Per il Western blot (WB), attendersi una banda a circa 52 kDa. Iniziare con diluizioni standard di IgG e ottimizzare empiricamente. Si raccomanda un controllo negativo (ad es., lisato con knockdown siRNA o knockout) per confermare la specificità.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), considerare i passaggi di recupero dell'antigene e testare su sezioni di tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina noti per esprimere ATP6AP1, come cervello o pancreas.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; tuttavia, l'abbinamento con un altro clone può migliorare la sensibilità. Titrare le concentrazioni di anticorpo per stabilire l'intervallo dinamico ottimale.

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