Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-ATP6V0D1 per WB, ELISA - P61421

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATP6V0D1

• ATP6V0D1 codifica per la subunità d1 del dominio V0 della vacuolar H+-ATPasi (V-ATPasi), anche indicata come proteina accessoria di 32 kDa, p39, subunità AC39 della V-ATPasi o subunità d1 della pompa protonica vacuolare.
• La V-ATPasi è un enzima multi-subunità responsabile dell'acidificazione di compartimenti intracellulari come lisosomi ed endosomi, e in alcuni tipi cellulari si localizza sulla membrana plasmatica per acidificare l'ambiente extracellulare. Riferimenti correlati: PMID:30374053
• Il complesso V-ATPasi agisce come attivatore per mTORC1 sulle membrane lisosomiali promuovendo l'attività del fattore di scambio nucleotidico (GEF) del complesso Ragulator, consentendo il reclutamento di mTORC1. Riferimenti correlati: PMID:22053050
• In condizioni aerobiche, ATP6V0D1 partecipa all'omeostasi intracellulare del ferro innescando l'attività della Fe(2+) prolil idrossilasi (PHD), che porta all'idrossilazione di HIF1A e alla sua successiva degradazione proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:28296633
• La proteina potrebbe anche contribuire alla biogenesi del ciglio attraverso la regolazione del trasporto proteico e della localizzazione al ciglio.
• A livello subcellulare, ATP6V0D1 è associata alle membrane, inclusa la membrana lisosomiale e la membrana delle vescicole rivestite di clatrina.
• È espressa in modo ubiquitario in tutti i tessuti.
• La proteina è classificata come fosfoproteina ed è identificata in studi proteomici; fa parte del proteoma di riferimento.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde all'intera lunghezza dell'ATP6V0D1 umano (amminoacidi 1–351), il che suggerisce che l'anticorpo possa riconoscere la proteina nativa. Per il Western blot, attendersi una banda vicina a 40 kDa; validare in lisati di umano, topo o ratto.
• Per l'ELISA, considerare l'uso di proteina ATP6V0D1 ricombinante o lisati cellulari come antigene di rivestimento e ottimizzare sperimentalmente la diluizione dell'anticorpo.
• Data l'espressione ubiquitaria della V-ATPasi, i livelli endogeni possono servire come controllo interno, ma notare la potenziale variazione tra tessuti e tipi cellulari.
• Poiché il bersaglio contiene domini transmembrana, utilizzare metodi di preparazione del campione appropriati per evitare aggregazioni; evitare condizioni di denaturazione aggressive se il segnale è debole.

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