Anticorpo policlonale coniglio anti-ATP7A per WB e ELISA - Q04656

Specifiche e parametri principali del prodotto

Informazioni biologiche: Funzione e localizzazione di ATP7A

• ATP7A, noto anche come Pompa del rame 1 o proteina associata alla malattia di Menkes, è una ATPasi trasportatrice di rame codificata dal gene ATP7A nell'uomo.
• Funziona come pompa del rame (Cu⁺) dipendente da ATP, fondamentale per l'omeostasi intracellulare degli ioni rame: acquisisce Cu⁺ dai donatori citoplasmatici e lo trasporta attraverso le membrane. Riferimenti correlati: PMID:10419525 PMID:11092760 PMID:28389643
• Il ciclo catalitico accoppia l'idrolisi dell'ATP alla traslocazione del rame, coinvolgendo la fosforilazione transitoria e un cambiamento conformazionale da stato orientato verso l'interno a stato orientato verso l'esterno. Riferimenti correlati: PMID:10419525 PMID:19453293 PMID:19917612
• Con bassi livelli di rame citosolico, ATP7A si localizza nella rete trans-Golgi per fornire Cu⁺ alle cuproenzimi della via secretoria; in caso di aumento del rame, si rilocalizza sulla membrana plasmatica per esportare il rame in eccesso. Riferimenti correlati: PMID:11092760 PMID:28389643 PMID:10419525
• Nei neuroni, ATP7A regola l'efflusso di rame e la trasmissione sinaptica, e fornisce Cu⁺ a enzimi come PAM, TYR e SOD3, svolgendo un doppio ruolo nella funzione e nella sopravvivenza neuronale. Riferimenti correlati: PMID:28389643
• Nei melanosomi, fornisce il cofattore rame alla tirosinasi (TYR) per la biosintesi della melanina.
• ATP7A è ampiamente espresso, tra cui nel cuore, cervello, polmone, muscolo, rene e pancreas, e a livelli più bassi nella placenta; si trova anche nei fibroblasti e nelle cellule endoteliali vascolari.
• La proteina subisce splicing alternativo e modifiche post-traduzionali come fosforilazione e glicosilazione, e svolge funzioni in vari compartimenti cellulari tra cui Golgi, membrana, endosomi e sinapsi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo è generato contro una proteina di fusione ricombinante corrispondente alla regione N-terminale (amminoacidi 1-79) dell'ATP7A umano. Si consiglia di verificare la specificità mediante analisi Western blot utilizzando linee cellulari o lisati di tessuto noti per esprimere ATP7A.
• Per Western blot (WB), si prevede che ATP7A migri a circa 163 kDa; tuttavia, le specifiche del prodotto indicano un intervallo ampio di 11-172 kDa, che potrebbe riflettere isoforme o prodotti di degradazione. Ottimizzare di conseguenza la percentuale di gel e le condizioni di trasferimento, e includere inibitori delle proteasi appropriati.
• È stata riportata reattività crociata con l'ATP7A di ratto; convalidare le prestazioni in campioni di ratto se si desidera la rilevazione interspecie.
• Per applicazioni ELISA, considerare di testare un intervallo di diluizioni dell'anticorpo e utilizzare controlli positivi e negativi appropriati.
• Poiché ATP7A è una proteina transmembrana, la scelta del tampone di lisi (es. RIPA) e la preparazione del campione (con o senza riscaldamento) possono influenzare la rilevazione. Determinare empiricamente le condizioni ottimali.

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