Anticorpo monoclonale coniglio anti-ATR per WB e ELISA - Q13535

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATR

• Protein serina/treonina chinasi che attiva la segnalazione dei checkpoint in seguito a stress genotossici come radiazioni ionizzanti, raggi UV o blocco della replicazione del DNA, funzionando come sensore del danno del DNA. Riconosce la sequenza consenso del substrato [ST]-Q. Riferimenti correlati: PMID:10597277, PMID:10608806, PMID:10859164

• Fosforila molteplici bersagli a valle tra cui BRCA1, CHEK1, MCM2, RAD17, RBBP8, RPA2, SMC1 e p53/TP53, inibendo collettivamente la replicazione del DNA e la mitosi promuovendo al contempo la riparazione del DNA, la ricombinazione e l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:11114888, PMID:11418864, PMID:11865061

• Fosforila la 'Ser-139' della variante istonica H2AX nei siti di danno del DNA, regolando la risposta al danno del DNA. Riferimenti correlati: PMID:11673449

• Fondamentale per mantenere la stabilità dei siti fragili e regolare in modo efficiente la duplicazione dei centrosomi. Riferimenti correlati: PMID:12526805

• Agisce come regolatore della transizione S-G2 limitando l'attività di CDK1 durante la fase S per prevenire l'ingresso prematuro nella G2. Riferimenti correlati: PMID:30139873

• Funziona come sensore di stress meccanico e regolatore dell'integrità dell'involucro nucleare; si rilocalizza sull'involucro nucleare in seguito a stress meccanico e media un checkpoint tramite la fosforilazione di CHEK1. Promuove inoltre la rottura dell'involucro nucleare in risposta al danno del DNA fosforilando LMNA alla 'Ser-282', innescando il disassemblamento delle lamine. Riferimenti correlati: PMID:25083873, PMID:37788673, PMID:37832547

• Coinvolto nell'immunità innata: si localizza nei micronuclei derivati dall'instabilità genomica, fosforila LMNA alla 'Ser-395' (preparando la successiva fosforilazione da parte di CDK1) e promuove la rottura dell'involucro dei micronuclei, che attiva la via cGAS-STING e la risposta dell'interferone di tipo I. Riferimenti correlati: PMID:37788673

• Localizzazione subcellulare: Nucleo, Cromosoma, Involucro nucleare. Specificità tissutale: Ubiquitario, con espressione massima nel testicolo. L'isoforma 2 si trova in pancreas, placenta e fegato ma non in cuore, testicolo e ovaio.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 2100-2200 dell'ATR umano. Questa regione può influenzare la specificità dell'anticorpo; verificare le prestazioni dell'anticorpo nella vostra applicazione target.
• Per il Western Blot, aspettarsi una banda a ~301 kDa. Considerare l'uso di gel SDS-PAGE a bassa percentuale (ad esempio, 6%) e tempi di trasferimento prolungati per garantire un trasferimento efficiente della proteina.
• L'anticorpo è riportato per l'uso in WB e ELISA e mostra reattività crociata con ATR umano e murino. Validare l'uso nella specie e nel tipo di tessuto corrispondente, come il testicolo dove l'espressione di ATR è massima.
• Per l'ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e rivelazione utilizzando protocolli standard.

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