Anticorpo policlonale di coniglio anti-ATRX per IF-P ed ELISA - P46100

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di ATRX

• ATRX (sindrome da alfa-talassemia/ritardo mentale legata all'X) è un rimodellatore della cromatina e un regolatore trascrizionale, noto anche come proteina nucleare legata all'X (XNP) o RAD54L.
• La funzione principale coinvolge l'attività di DNA translocasi ATP-dipendente, facilitando il deposito indipendente dalla replicazione dell'istone H3.3 nelle ripetizioni pericentriche e nei telomeri, e il rimodellamento delle strutture di DNA G4.
• Appartiene alla famiglia delle elicasi SNF2/RAD54, contenente un dominio N-terminale ATRX-DNMT3-DNMT3L (ADD), un dominio elicasi C-terminale e un motivo a dita di zinco Znf-HX.
• La localizzazione subcellulare è principalmente nucleare, con arricchimento nei telomeri e nei corpi nucleari PML.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione; gli studi di proteomica suggeriscono anche metilazione e sumoilazione (legame isopeptidico).
• I rapporti sul suo coinvolgimento nella regolazione di TERRA sono contrastanti; nei fibroblasti, non è sufficiente a diminuire la condensazione della cromatina ai telomeri né ad aumentare l'espressione dell'RNA telomerico (PubMed:24500201). Riferimenti correlati: PMID:24500201
• ATRX forma un complesso con ZNF274, TRIM28 e SETDB1 per mantenere H3K9me3 negli esoni 3' dei geni a dita di zinco, collegando il silenziamento epigenetico al rimodellamento della cromatina (PubMed:27029610). Riferimenti correlati: PMID:27029610
• È espresso ubiquitariamente e implicato in diversi processi, tra cui la riparazione dei danni al DNA, il mantenimento dei telomeri tramite ALT e la regolazione genica allele-specifica nei loci impressi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 2273–2413, una regione vicino al C-terminale; assicurarsi che l'anticorpo riconosca la banda prevista di ~283 kDa nel Western blot denaturante, se utilizzato, sebbene siano elencati solo IF-P ed ELISA.
• Per l'immunofluorescenza (IF-P), utilizzare una fissazione appropriata (es. 4% PFA) e la permeabilizzazione (0,1–0,5% Triton X-100) per accedere agli antigeni nucleari; includere un controllo negativo senza anticorpo primario.
• Nell'ELISA, titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale-rumore; considerare l'utilizzo di proteina ATRX ricombinante o lisati cellulari da linee che esprimono ATRX come antigeni di rivestimento.
• È indicata la reattività crociata con il topo; convalidare le prestazioni in tessuti/cellule di topo se il sistema sperimentale lo richiede.

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