Anticorpo policlonale di coniglio anti-ATRX per WB, ELISA - P46100

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ATRX

• ATRX (regolatore trascrizionale ATRX, elicasi II legata al cromosoma X, XNP, Znf-HX) è un rimodellatore della cromatina codificato dal gene ATRX (RAD54L, XH2) nell'uomo.
• Svolge un ruolo centrale nella regolazione trascrizionale e nel rimodellamento della cromatina; facilita la replicazione del DNA in specifici loci genomici e si lega a ripetizioni tandem del DNA e a strutture quadruplex G4, incorporando nucleosomi contenenti H3.3 per stabilizzare queste regioni.
• Funziona come subunità catalitica del complesso ATRX:DAXX, che presenta attività di traslocasi del DNA ATP-dipendente e media il deposito indipendente dalla replicazione dell'istone H3.3 nelle ripetizioni pericentriche e nei telomeri.
• Esistono evidenze contrastanti riguardo al suo ruolo nella regolazione di TERRA: uno studio indica che non è sufficiente ad aumentare l'espressione di TERRA o a diminuire la condensazione della cromatina telomerica nei fibroblasti. Riferimenti correlati: PMID:24500201
• ATRX forma un complesso con ZNF274, TRIM28 e SETDB1 per depositare e mantenere H3K9me3 negli esoni 3' dei geni con dita di zinco. Riferimenti correlati: PMID:27029610
• Agisce come regolatore negativo dell'incorporazione dell'istone macroH2A1 nei telomeri e nel cluster dell'alfa-globina.
• Partecipa all'espressione genica allele-specifica nel locus IGF2/H19 soggetto a imprinting, facilitando l'occupazione della cromatina da parte di SMC1 e CTCF sull'allele materno.
• Localizzazione subcellulare: prevalentemente nucleare, associata a cromosomi, telomeri e corpi PML.
• Specificità tissutale: espresso ubiquitariamente nei tessuti umani.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 2100–2200 di ATRX umano. Si consiglia di verificare la specificità dell'anticorpo mediante saggi di competizione con il peptide o confrontando i segnali in campioni knockout per ATRX rispetto a campioni wild-type.
• Per il Western blot, si noti che ATRX è una proteina di grandi dimensioni (~283 kDa); utilizzare un gel di poliacrilammide a bassa percentuale (ad es. 6–8%) e garantire un trasferimento efficiente prolungando i tempi di trasferimento o utilizzando protocolli ottimizzati per proteine ad alto peso molecolare.
• Questo anticorpo rileva ATRX umano e murino; se si lavora con tessuti murini, validare la reattività crociata nel proprio sistema modello.
• Nelle applicazioni ELISA, il peptide immunogeno può essere utilizzato come antigene di rivestimento per determinare il titolo anticorpale o impostare saggi competitivi.

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