Anticorpo policlonale Anti-AURKA per WB e ELISA - O14965

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AURKA

• AURKA è una serina/treonina chinasi mitotica essenziale per la progressione del ciclo cellulare, la maturazione del centrosoma e l'assemblaggio del fuso mitotico (PubMed:11039908, PubMed:12390251, PubMed:17125279, PubMed:14523000, PubMed:26246606). Riferimenti correlati: PMID:11039908, PMID:12390251, PMID:17125279, PMID:14523000, PMID:26246606
• Si localizza ai centrosomi, ai poli del fuso mitotico e ai corpi basali, ed è necessario per l'allineamento corretto dei cromosomi e la citochinesi (PubMed:14523000, PubMed:26246606). Riferimenti correlati: PMID:14523000, PMID:26246606
• AURKA fosforila numerosi substrati tra cui BORA, CDC25B, PLK1 e TPX2, coordinando così l'ingresso e la progressione della mitosi (PubMed:11551964, PubMed:14702041, PubMed:15128871). Riferimenti correlati: PMID:11551964, PMID:14702041, PMID:15128871
• La chinasi regola la dinamica dei microtubuli tramite fosforilazione di TACC3 e HDAC6, influenzando la stabilità del fuso e il disassemblaggio delle ciglia (PubMed:14702041, PubMed:17604723, PubMed:20643351). Riferimenti correlati: PMID:14702041, PMID:17604723, PMID:20643351
• Inibisce il soppressore tumorale p53/TP53 tramite fosforilazione, promuovendo la trasformazione oncogenica ed è frequentemente sovraespresso nel cancro (PubMed:14702041). Riferimenti correlati: PMID:14702041
• AURKA è altamente espresso nel testicolo e debolmente nel muscolo scheletrico, timo e milza; è inoltre altamente espresso in linee cellulari di cancro del colon, ovarico, prostatico, neuroblastoma, mammario e cervicale.
• L'attività di AURKA è regolata dall'ubiquitinazione e dall'interazione con regolatori mitotici chiave come TPX2 e la proteina fosfatasi 1 (PubMed:11551964). Riferimenti correlati: PMID:11551964

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-130) di AURKA umana; questa regione è unica e può ridurre al minimo la reattività incrociata con altre aurora chinasi, ma si raccomanda la convalida nel sistema modello pertinente.
• Per l'analisi Western blot, è attesa una banda vicino a 46 kDa; si consiglia di utilizzare HeLa o un altro lisato di linea cellulare cancerosa come controllo positivo e determinare empiricamente la diluizione ottimale dell'anticorpo.
• In ELISA, rivestire le piastre con proteina AURKA ricombinante e titolare l'anticorpo; l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione convalidato può richiedere un'ottimizzazione individuale.
• Per confermare la specificità, si può utilizzare il knockdown di AURKA mediato da siRNA o la pre-adsorbimento con l'immunogeno; questi controlli sono fondamentali per la ricerca pubblicata.

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