Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-AURKC per WB, IHC-P, ELISA - Q9UQB9

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AURKC

• AURKC, anche noto come Aurora chinasi C, AIE2, AIK3, ARK3 e STK13, è una serina/treonina-proteina chinasi che appartiene alla famiglia delle Aurora chinasi, che include AURKA e AURKB.
• AURKC è un componente del complesso passeggero cromosomico (CPC), un regolatore chiave della mitosi, essenziale per il corretto allineamento e segregazione cromosomica, la stabilizzazione dei microtubuli indotta dalla cromatina e l'assemblaggio del fuso.
• AURKC svolge un ruolo critico nella meiosi e nella spermatogenesi; la sua espressione è rilevata prevalentemente nel testicolo, con livelli massimi durante la fase M.
• AURKC fosforila l'istone H3 in 'Ser-10' e 'Ser-28', una funzione ridondante con AURKB; può compensare un knockdown di AURKB, suggerendo ruoli sovrapposti nella divisione cellulare.
• AURKC fosforila le subunità del CPC BIRC5/survivina e INCENP, portando a una maggiore attività chinasica, e fosforila anche TACC1 in 'Ser-228', collegandola alla regolazione della divisione cellulare.
• A livello subcellulare, AURKC si localizza nel nucleo, nei centromeri cromosomici e nel fuso mitotico citoplasmatico, in linea con le sue funzioni mitotiche.
• La proteina ha un peso molecolare previsto di ~35.6 kDa (UniProt) e un peso apparente di 36 kDa (sperimentale), ed è soggetta a splicing alternativo che produce due isoforme espresse nel testicolo.
• Sebbene espressa principalmente nel testicolo, livelli elevati di AURKC sono osservati in un sottoinsieme di linee cellulari tumorali come Hep-G2, Huh-7 e HeLa, indicando un possibile ruolo nell'oncogenesi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) di AURKC umano; l'anticorpo può riconoscere entrambe le isoforme di AURKC e potenzialmente reagire in modo incrociato con AURKB a causa dell'omologia di sequenza in questa regione. Verificare la specificità nel sistema campione rilevante, specialmente quando si utilizzano controlli di knockdown o è richiesta una rilevazione isoforma-specifica.
• Per il Western blotting, ci si aspetta una banda a ~36 kDa; considerare l'uso di condizioni riducenti e appropriati controlli di caricamento proteico. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rilevazione per i vostri lisati cellulari o tissutali specifici.
• Nell'immunoistochimica (paraffina), potrebbe essere necessaria la recuperazione dell'antigene; validare la colorazione in controlli positivi come testicolo o linee cellulari tumorali mitotiche.
• Per l'ELISA, associare l'anticorpo a un sistema di cattura/rilevazione adeguato e validare la linearità e la sensibilità per l'antigene target; notare che la reattività incrociata con le Aurora chinasi correlate dovrebbe essere valutata.
• Data il pattern di espressione, considerare l'uso di campioni sincronizzati nel ciclo cellulare per arricchire il segnale di AURKC, poiché l'espressione raggiunge il picco nella fase M.

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