Anticorpo policlonale anti-B-Raf V600E per WB ed ELISA - P15056

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di B-Raf

• B-Raf è una serina/treonina-proteina chinasi che agisce come trasduttore chiave della via di segnalazione mitogena RAS-RAF-MEK-ERK fosforilando MAP2K1/MEK1 (PubMed:21441910, PubMed:29433126).
  Riferimenti correlati:
  PMID:21441910, PMID:29433126
• Fosforila inoltre PFKFB2, integrando così la segnalazione dei fattori di crescita con il metabolismo cellulare del glucosio (PubMed:36402789).
  Riferimenti correlati:
  PMID:36402789
• B-Raf può contribuire alla plasticità sinaptica, come suggerito dal suo ruolo nelle risposte postsinaptiche dei neuroni dell'ippocampo (PubMed:1508179).
  Riferimenti correlati:
  PMID:1508179
• La mutazione V600E (sostituzione della valina con il glutammato in posizione 600) all'interno del dominio chinasico determina un'attività chinasica costitutiva ed è un comune fattore determinante nei tumori della pelle, del colon-retto e della tiroide.
• B-Raf è localizzato nel nucleo, nel citoplasma e nella membrana cellulare, in linea con il suo ruolo nella trasmissione dei segnali extracellulari agli effettori intracellulari.
• La proteina è espressa prevalentemente nel cervello e nei testicoli ed è soggetta a modifiche regolatorie, tra cui acetilazione, metilazione e ubiquitinazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 507–606 e include il sito della mutazione V600E; questo design può conferire specificità per il mutante rispetto a B-Raf wild-type.
• Per il Western blot, utilizzare un gel SDS-PAGE standard ottimizzato per una proteina di circa 84 kDa e validare il rilevamento utilizzando lisati di cellule che esprimono B-Raf wild-type o V600E.
• Nell'ELISA, valutare l'inclusione del peptide immunizzante come controllo positivo per confermare la specificità del legame.
• Essendo un anticorpo policlonale, è possibile una variabilità tra i diversi lotti; si raccomanda di confermare le prestazioni di ogni nuovo lotto nel proprio sistema di analisi specifico.

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