Anticorpo policlonale coniglio anti-B7-H4 / B7S1 / B7x per WB, ELISA - Q7Z7D3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di B7-H4 / VTCN1

• B7-H4 (Inibitore dell'attivazione delle cellule T contenente dominio V-set 1) è un membro della superfamiglia delle immunoglobuline, che agisce come un importante regolatore negativo delle risposte immuni mediate dalle cellule T inibendo l'attivazione, la proliferazione, la produzione di citochine e la citotossicità delle cellule T.
• La proteina contiene domini extracellulari simili a immunoglobuline, una regione transmembrana e una breve coda citoplasmatica, coerente con il suo ruolo di molecola di checkpoint immunitaria di superficie cellulare.
• B7-H4 fa parte della famiglia B7 di molecole costimolatorie, sebbene funzioni principalmente come ligando coinibitorio, condividendo omologia strutturale con B7-H1 (PD-L1) e B7-H2.
• A livello subcellulare, B7-H4 è localizzato sulla membrana cellulare, dove interagisce con recettori putativi sulle cellule T per trasmettere segnali inibitori.
• B7-H4 è sovraespresso in una varietà di tumori umani, inclusi carcinoma mammario, ovarico, endometriale, carcinoma a cellule renali (RCC) e carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC), mentre la sua espressione proteica è in gran parte assente nella maggior parte dei tessuti normali.
• A livello proteico, B7-H4 si trova sulle cellule T attivate, cellule B, monociti e cellule dendritiche, e svolge un ruolo nell'evasione immunitaria tumorale sopprimendo l'immunità delle cellule T specifica per l'antigene tumorale associato nel microambiente tumorale.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme e la proteina subisce modifiche post-traduzionali, inclusa glicosilazione e formazione di ponti disolfuro, che sono essenziali per la sua struttura e funzione.
• B7-H4 è stato implicato nella promozione della trasformazione delle cellule epiteliali, collegando la sua espressione alla tumorigenesi oltre la regolazione immunitaria.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aminoacidi 25–259) di B7-H4 umano, che è accessibile sulla superficie cellulare; questo design supporta il suo utilizzo in applicazioni che richiedono il riconoscimento dell'epitopo nativo, come il Western blot di lisati cellulari e l'ELISA.
• Quando si esegue un Western blot, si noti che B7-H4 può apparire come bande multiple a causa della glicosilazione e dello splicing alternativo; l'intervallo del peso molecolare riportato è 9–30 kDa, e le condizioni riducenti rispetto a quelle non riducenti possono influenzare i pattern delle bande.
• Questo anticorpo cross-reattiva con B7-H4 di topo, rendendolo adatto per studi su modelli murini; tuttavia, gli utenti dovrebbero validare le prestazioni nel tipo di campione specifico e nel contesto sperimentale.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo monoclonale di rilevamento abbinato per ottenere una maggiore specificità e un intervallo dinamico; ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e rilevamento utilizzando uno standard proteico ricombinante.
• Nell'analisi dei tessuti tumorali, verificare lo stato di sovraespressione di B7-H4 nei campioni (es. tumori al seno, ovarici, polmonari) e includere appropriati controlli di tessuto normale, poiché l'espressione è bassa o assente nella maggior parte dei tessuti normali.

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