Anticorpo Policlonale Anti-Bak da Coniglio per WB, ELISA - Q16611

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Bak

• Bak (antagonista/uccisore omologo di Bcl-2), noto anche come regolatore dell'apoptosi BAK o Bcl2-L-7, è un membro pro-apoptotico della famiglia proteica Bcl-2.
• Codificato dal gene BAK1 (ID Gene: 578), svolge un ruolo critico nella via apoptotica mitocondriale intrinseca.
• In seguito a stimoli apoptotici, Bak si oligomerizza e forma pori nella membrana mitocondriale esterna (MOM), portando alla permeabilizzazione e al rilascio nel citosol di fattori apoptogenici come il citocromo c.
• Questo rilascio innesca l'attivazione della caspasi 9 e delle caspasi effettrici a valle, eseguendo il programma di morte cellulare.
• Bak è localizzato principalmente sulla membrana mitocondriale esterna, in linea con la sua funzione nella regolazione dell'apoptosi.
• È ampiamente espresso nei tessuti umani, con i livelli di espressione più alti nel cuore e nel muscolo scheletrico.
• Modificazioni post-traduzionali, inclusa l'acetilazione e il legame con lo zinco, possono regolare l'attività di Bak, e lo splicing alternativo genera diverse isoforme.
• La proteina interagisce con fattori dell'ospite durante l'infezione virale, sottolineando il suo ruolo nelle interazioni ospite-virus.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico corrispondente ai primi 1–100 amminoacidi N-terminali della proteina Bak umana; ci si aspetta che riconosca la proteina Bak endogena a lunghezza intera.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è ~23 kDa; si consiglia di utilizzare frazioni arricchite in mitocondri o lisati di controllo positivo da cuore o muscolo scheletrico dove l'espressione di Bak è massima.
• Quando si esegue l'ELISA, titolare l'anticorpo per determinare le concentrazioni ottimali di rivestimento e rilevamento, e validare la specificità utilizzando proteina Bak ricombinante o saggi di competizione con peptide.
• È riportata reattività crociata con il topo; tuttavia, validare nel proprio sistema specifico di campioni, poiché il rilevamento può variare in base alla preparazione del campione e all'accessibilità dell'epitopo.
• Poiché Bak è una proteina di membrana mitocondriale, assicurarsi di utilizzare buffer di lisi appropriati e condizioni denaturanti per esporre l'epitopo.

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