Anticorpo monoclonale coniglio Anti-BANF1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75531

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di BANF1 (Barrier-to-autointegration factor)

• Il Barrier-to-autointegration factor (BANF1), noto anche come breakpoint cluster region protein 1, è una proteina legante il DNA aspecifica codificata dal gene BANF1. Svolge ruoli chiave nel riassemblaggio nucleare mitotico, nell'organizzazione della cromatina, nella risposta al danno al DNA, nell'espressione genica e nell'immunità intrinseca contro il DNA estraneo. Riferimenti correlati: PMID:10908652, PMID:11792822, PMID:12163470

• Contiene due siti di legame aspecifici per il DNA a doppio filamento (dsDNA) che promuovono il cross-bridging del DNA, essenziale per le sue funzioni architettoniche della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:9465049

• All'uscita dalla mitosi, BANF1 guida la riformazione della membrana nucleare ponendo un ponte transitorio tra i cromosomi in anafase, formando una densa rete di cromatina che confina le membrane alla superficie cromosomica. Riferimenti correlati: PMID:28841419

• Regola negativamente l'attivazione immunitaria innata competendo con CGAS per il legame al DNA in seguito alla perdita dell'integrità della membrana nucleare, prevenendo così le risposte autoinfiammatorie mediate da CGAS. Riferimenti correlati: PMID:32792394

• Nella risposta al danno al DNA, BANF1 interagisce con PARP1 sotto stress ossidativo, inibendo l'attività ADP-ribosiltransferasica di PARP1. Inoltre, riconosce il dsDNA esogeno nel citosol immediatamente dopo la rottura dell'endosoma per prevenire l'autofagia e, nell'infezione da poxvirus, blocca la replicazione del DNA virale. Riferimenti correlati: PMID:31796734, PMID:25991860, PMID:18005698

• I retrovirus sfruttano BANF1 per inibire l'autointegrazione, promuovendo l'integrazione del DNA virale nel genoma dell'ospite. Sia BAF che l'emerina (EMD) fungono da cofattori per l'infezione da HIV-1. Riferimenti correlati: PMID:11005805, PMID:16680152, PMID:9465049

• BANF1 si localizza nel nucleo, sui cromosomi, nell'involucro nucleare e nel citoplasma. È ampiamente espresso in tessuti tra cui colon, cervello, cuore, rene, fegato, polmone, ovaio, pancreas, placenta, prostata, muscolo scheletrico, intestino tenue, milza e testicolo, ma è assente nel timo e nei leucociti del sangue periferico.

• La proteina subisce acetilazione e fosforilazione, e le mutazioni sono associate alla sindrome di Nestor-Guillermo (NGPS) e all'osteoporosi.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Come anticorpo monoclonale di coniglio, questo clone anti-BANF1 offre specificità costante e basso rumore di fondo nei saggi immunoenzimatici. Per il Western blot, ci si aspetta una banda di ~10 kDa; assicurarsi di utilizzare un gel ad alta percentuale (es. 15%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine piccole.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore in tampone citrato pH 6.0); validare nel sistema tissutale rilevante.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), si raccomanda la permeabilizzazione con Triton X-100 o simile per consentire all'anticorpo di accedere agli antigeni nucleari.
• Per l'ELISA, questo anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevamento; eseguire esperimenti di accoppiamento per confermare la compatibilità con il vostro antigene.
• Controlli positivi: lisati cellulari di HeLa, HEK293 (umano), NIH/3T3 (topo) o NRK (ratto).
• Data la reattività incrociata con topo e ratto, è adatto per studi su organismi modello; tuttavia, i livelli di espressione della proteina bersaglio e la conservazione dell'epitopo dovrebbero essere confermati.
• Conservare a -20°C al ricevimento; evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento per mantenere l'attività.

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