Anticorpo policlonale coniglio anti-BAP1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q92560

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di BAP1

• BAP1 è una idrolasi ubiquitina carbossi-terminale che funziona come enzima deubiquitinante, rimuovendo l'ubiquitina dall'istone H2A e HCFC1, regolando così la dinamica della cromatina e l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:12485996, PMID:18757409, PMID:20436459
• Come subunità catalitica del complesso deubiquitinasi Polycomb repressivo (PR-DUB), media specificamente la deubiquitinazione dell'istone H2A monoubiquitinato a Lys-120 (H2AK119ub1), ma non H2B. Riferimenti correlati: PMID:20436459, PMID:25451922, PMID:30664650
• Il complesso PR-DUB agisce come coattivatore trascrizionale antagonizzando la monoubiquitinazione H2AK119ub1 mediata da PRC1 ed è reclutato nelle regioni di regolazione genica da YY1, influenzando i geni coinvolti nello sviluppo, nella proliferazione cellulare e nella vitalità. Riferimenti correlati: PMID:20805357, PMID:30664650, PMID:36180891
• BAP1 regola la crescita cellulare deubiquitinando HCFC1, mostrando preferenza per le catene poliubiquitinate legate a Lys-48 rispetto a quelle legate a Lys-63, sebbene ciò non influenzi la stabilità di HCFC1. Riferimenti correlati: PMID:19188440, PMID:19815555
• Regola negativamente la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) nelle cellule staminali trofoblastiche durante lo sviluppo placentare, mantenendo l'integrità epiteliale e l'adesione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:34170818
• BAP1 subisce autodeubiquitinazione per proteggere il suo segnale di localizzazione nucleare dalla monoubiquitinazione, prevenendo il sequestro citoplasmatico; è anche una fosfoproteina. Riferimenti correlati: PMID:24703950
• È altamente espresso nel testicolo, placenta, ovaio e tessuto mammario, con livelli che aumentano durante la gravidanza, e si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nei cromosomi.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-270 di BAP1 umano (NP_004647.1), che include il dominio catalitico dell'ubiquitina; questo design può generare anticorpi contro più epitopi all'interno di questa regione.
• Per WB, BAP1 ha un peso molecolare previsto di 80 kDa; convalidare con appropriati controlli positivi (ad es. lisati cellulari umani, murini o di ratto).
• In IHC-P e IF/ICC, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo; è prevista una colorazione nucleare.
• L'ELISA può essere utilizzato per la determinazione del titolo anticorpale; considerare l'uso dell'immunogeno ricombinante come antigene di rivestimento.
• È riportata la reattività crociata con BAP1 di topo e ratto; verificare la conservazione della sequenza dell'immunogeno in queste specie per un rilevamento accurato.

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