Anticorpo policlonale Anti-BCKDK per WB, IF/ICC, ELISA - O14874

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di BCKDK

• BCKDK è una serina/treonina proteina chinasi che funge da principale regolatore metabolico, formando una coppia funzionale con la fosfatasi PPM1K per coordinare il catabolismo degli amminoacidi a catena ramificata (BCAA) con il metabolismo del glucosio e dei lipidi. Riferimenti correlati: PMID:24449431 PMID:29779826 PMID:37558654
• Fosforila e inattiva il complesso mitocondriale dell'alfa-chetoacido deidrogenasi a catena ramificata (BCKDH) prendendo di mira la subunità BCKDHA in Ser-337, interrompendo così il canaling del substrato e riducendo la degradazione dei BCAA.
• Inoltre, BCKDK fosforila l'ATP-citrato liasi citosolica (ACLY) in Ser-455 in risposta all'abbondanza di carboidrati, promuovendo la lipogenesi e la gluconeogenesi durante la transizione dal digiuno all'alimentazione. Riferimenti correlati: PMID:29779826
• La proteina si localizza nella matrice mitocondriale.
• BCKDK è espresso ubiquitariamente nei tessuti umani.
• Le annotazioni UniProt associano BCKDK ai disturbi dello spettro autistico, all'epilessia e alla disabilità intellettiva.
• La chinasi riconosce un motivo distinto del sito di fosforilazione SxxE/D.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 153-412) ricade all'interno del dominio chinasi; prendere in considerazione l'allineamento delle sequenze per prevedere la reattività crociata tra specie e isoforme.
• Per la WB, è prevista una banda vicino ai 46 kDa previsti; includere sempre controlli positivi (es. lisati di tessuti umano/ratto) e negativi per confermare la specificità.
• Nell'IF/ICC, possono essere osservati pattern di colorazione mitocondriale; si consiglia la colorazione combinata con marcatori di organelli per la convalida.
• Per l'ELISA, titolare sia le concentrazioni dell'antigene di rivestimento che dell'anticorpo per ottenere rapporti segnale/rumore ottimali.

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