Anticorpo Policlonale Anti-Bcl-2 per WB, IP, ELISA - P49950

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Bcl-2

• Bcl-2, codificato dal gene Bcl2, è una proteina anti-apoptotica chiave che sopprime la morte cellulare programmata in vari sistemi cellulari, comprese le cellule linfoemopoietiche e neurali dipendenti da fattori.
• Regola la morte cellulare controllando la permeabilità della membrana mitocondriale, funzionando in un circuito di retroazione con le caspasi. Inibisce l'attività delle caspasi sia prevenendo il rilascio del citocromo c dai mitocondri sia legandosi al fattore di attivazione dell'apoptosi APAF-1.
• Oltre all'apoptosi, Bcl-2 agisce come inibitore dell'autofagia: interagisce con BECN1 e AMBRA1 in condizioni di non digiuno per sopprimere la funzione autofagica.
• Può anche attenuare l'infiammazione riducendo l'attivazione dell'inflammasoma NLRP1, diminuendo conseguentemente l'attivazione di CASP1 e il rilascio di IL1B.
• Subcellularmente, Bcl-2 si localizza sulla membrana esterna mitocondriale, sulla membrana nucleare, sulla membrana del reticolo endoplasmatico e nel citoplasma.
• L'espressione tissutale è ampia, con i livelli più alti nei tessuti riproduttivi. Nel cervello adulto è presente nelle cellule mitrali del bulbo olfattorio, nei granuli dell'ippocampo e nei neuroni piramidali, nei nuclei pontini, nei neuroni granulari cerebellari e nelle cellule ependimali; l'espressione prenatale nel cervello è più alta nel neuroepitelio e nella placca corticale.
• La proteina ha un peso molecolare calcolato di circa 26,6 kDa ed è soggetta a modifiche post-traduzionali come fosforilazione e ubiquitinazione (coniugazione Ubl).

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno include un peptide sintetico corrispondente ai residui 1–100 di Bcl-2 di ratto, il che indica che l'anticorpo riconosce la regione N-terminale. Questa regione può essere conservata tra le specie; la reattività crociata con il topo è confermata, ma è necessario convalidare i test su specie aggiuntive.
• Per Western blot (WB), caricare lisati di controllo positivi appropriati (ad esempio da tessuti/cellule di ratto o topo che esprimono Bcl-2) e aspettarsi una banda a ~26 kDa. Le condizioni riducenti sono tipicamente utilizzate, ma potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione.
• Per immunoprecipitazione (IP), titolare la quantità di anticorpo e includere controlli di isotipo appropriati. La depurazione preventiva dei lisati può ridurre il legame non specifico.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; convalidare l'abbinamento con un anticorpo secondario adatto per il formato del vostro saggi.
• Includere sempre controlli negativi appropriati per valutare la specificità e considerare di effettuare i test nel sistema endogeno di interesse.

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