Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Bcl-XL per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q07817

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Bcl-XL

• La proteina simile a Bcl-2 1 (Bcl-X) è un regolatore dell'apoptosi codificato dal gene BCL2L1, che produce due isoforme principali tramite splicing alternativo: Bcl-X(L) (lunga) e Bcl-X(S) (corta).
• Bcl-X(L) inibisce potentemente la morte cellulare bloccando il canale anionico dipendente dalla tensione (VDAC) sulla membrana mitocondriale, prevenendo il rilascio del citocromo c (CYC1) e la successiva attivazione delle caspasi. Regola anche il checkpoint G2 e la progressione verso la citochinesi durante la mitosi.
• L'isoforma Bcl-X(S) promuove l'apoptosi, in contrasto con il ruolo anti-apoptotico di Bcl-X(L).
• Bcl-X(L) si localizza sulle membrane mitocondriali interne ed esterne, nella matrice mitocondriale, nonché sulle membrane delle vescicole sinaptiche, nel citoplasma, sui centrosomi e sulle membrane nucleari, riflettendo i suoi molteplici ruoli.
• Nei neuroni, Bcl-X(L) regola la plasticità presinaptica controllando il rilascio e il recupero dei neurotrasmettitori, il numero di mitocondri assonali e la dimensione degli aggregati di vescicole sinaptiche. Durante la stimolazione sinaptica, aumenta la disponibilità di ATP mitocondriale tramite la regolazione della F(1)F(0) ATP sintasi e facilita il recupero delle vescicole endocitiche tramite l'attivazione della GTPasi DMN1L (PubMed:17418785). Riferimenti correlati: PMID:17418785
• Bcl-X(L) può attenuare l'infiammazione danneggiando l'attivazione dell'inflammasoma NLRP1, riducendo così l'attivazione di CASP1 e il rilascio di IL1B.
• Espressione tessuto-specifica: Bcl-X(S) è altamente espresso nelle cellule con alto turnover (es. linfociti in via di sviluppo), mentre Bcl-X(L) predomina nelle cellule postmitotiche longeve come il cervello adulto.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e coniugazione dell'ubiquitina, come indicato dalle parole chiave.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-80) di Bcl-XL umano, conservata tra uomo, topo e ratto, e supporta un'ampia reattività.
• Per il Western blotting, è previsto una banda intorno a 26–30 kDa per Bcl-X(L). Bcl-X(S) può apparire come una banda più piccola (~20 kDa) a seconda del tipo di tessuto/cellula. Utilizzare controlli positivi appropriati come lisati di HeLa, Jurkat o cervello.
• Per IHC-P, convalidare con tessuti noti per essere positivi a Bcl-XL (es. cervello, tessuti linfoidi); il recupero dell'antigene potrebbe essere necessario.
• Per IF/ICC, Bcl-XL si localizza nei mitocondri; si raccomanda la co-colorazione con marcatori mitocondriali (es. MitoTracker).
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di cattura in ELISA sandwich se abbinato a un anticorpo di rilevamento corrispondente; ottimizzare le condizioni di rivestimento.
• Essendo un anticorpo policlonale, verificare la coerenza lotto per lotto nel sistema di saggi previsto.

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