Anticorpo policlonale di coniglio anti-Bcl-XL (validato KD) per WB, ELISA - Q07817

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di Bcl-XL

• La proteina 1 simile a Bcl-2 (Bcl-XL) è un membro chiave della famiglia Bcl-2 con funzione anti-apoptotica, codificata dal gene BCL2L1. Lo splicing alternativo produce due isoforme principali: Bcl-X(L), l'isoforma lunga che inibisce l'apoptosi, e Bcl-X(S), l'isoforma corta che promuove l'apoptosi.
• Bcl-X(L) inibisce potentemente la morte cellulare legandosi al canale anionico voltaggio-dipendente (VDAC) sulla membrana mitocondriale esterna, impedendo il rilascio del citocromo c e bloccando l'attivazione delle caspasi.
• L'isoforma Bcl-X(L) svolge inoltre un ruolo nella regolazione della plasticità presinaptica, compresi il rilascio e il recupero dei neurotrasmettitori, la disponibilità di ATP mitocondriale e il recupero delle vescicole endocitiche nei neuroni ippocampali, attraverso l'associazione con DNM1L e la stimolazione della sua attività GTPasica. Può inoltre attenuare l'infiammazione compromettendo l'attivazione dell'inflammasoma NLRP1 e inibendo così l'attivazione di CASP1 e il rilascio di IL1B. Riferimenti correlati: PMID:17418785
• Bcl-XL è localizzata in molteplici compartimenti subcellulari, comprese le membrane mitocondriali interna ed esterna, la matrice mitocondriale, le vescicole citoplasmatiche (ad esempio, le vescicole sinaptiche), il citosol, il centrosoma e la membrana nucleare.
• La proteina viene espressa in modo tessuto-specifico: Bcl-X(L) è abbondante nelle cellule postmitotiche longeve, come quelle del cervello adulto, mentre Bcl-X(S) è presente nelle cellule ad alto ricambio, come i linfociti in sviluppo.
• Le modifiche post-traduzionali e le parole chiave aggiuntive includono fosforilazione, ubiquitinazione, splicing alternativo ed elica transmembrana; questi elementi sono fondamentali per la sua regolazione e funzione nei processi di apoptosi, endocitosi e nelle funzioni sinaptiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa1-120 di Bcl-XL umano) comprende una regione comune a entrambe le isoforme Bcl-X(L) e Bcl-X(S); pertanto, l'anticorpo può riconoscere entrambe le forme. Si consiglia di convalidare la specificità per l'isoforma utilizzando controlli o metodi di rilevamento specifici per l'isoforma.
• Per il Western blot, si prevede una banda predominante intorno a 26 kDa corrispondente a Bcl-X(L), con possibili bande aggiuntive per altre isoforme o modifiche post-traduzionali. Ottimizzare le condizioni di caricamento e trasferimento e utilizzare lisati cellulari positivi e negativi appropriati.
• Questo anticorpo è validato per Western blot ed ELISA. Per l'ELISA, si consiglia di utilizzare la proteina Bcl-XL ricombinante o lisati cellulari e di includere controlli appropriati per garantire la specificità del segnale.
• Considerato il coinvolgimento di Bcl-XL nell'apoptosi, i livelli di espressione possono variare in funzione del trattamento cellulare o dello stato patologico; pertanto, includere controlli del trattamento (ad esempio, induttori dell'apoptosi) negli esperimenti.

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