Anticorpo Monoclonale Anti-BCL6 () per Citometria a Flusso Intracellulare - P41182

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BCL6

• BCL6 (B-cell lymphoma 6) è un repressore trascrizionale cruciale per la formazione del centro germinativo e la maturazione dell'affinità anticorpale, codificato dal gene BCL6 (GeneID: 604) con multiple isoforme generate da splicing alternativo.
• Si lega alla sequenza consenso del DNA 5'-TTCCTAGAA-3' e recluta complessi corepressori, inclusi iston deacetilasi, per silenziare geni bersaglio coinvolti nella differenziazione, apoptosi e controllo del ciclo cellulare nelle cellule B del centro germinativo.
• BCL6 autoregola la propria espressione e regola positivamente indirettamente AICDA reprimendo microRNA come miR-155, promuovendo così la ricombinazione dello scambio di classe delle immunoglobuline e l'ipermutazione somatica mentre sopprime l'apoptosi dipendente da p53.
• Nelle cellule T helper follicolari (TFH), BCL6 guida il programma genico TFH e inibisce la differenziazione nei lignaggi TH1, TH2 e TH17, ed è essenziale per la memoria immunologica sia nelle cellule B che T.
• Reprime anche la proliferazione dei macrofagi competendo con STAT5 per i motivi di legame su geni bersaglio come CCL2 e CCND2, e media l'arresto del ciclo cellulare nelle cellule B del centro germinativo sotto stress genotossico tramite vie dipendenti e indipendenti da p53.
• Oltre all'immunità, BCL6 controlla la neurogenesi alterando la trascrizione dipendente da NOTCH su bersagli come HES5, reclutando la deacetilasi SIRT1 per indurre silenziamento epigenetico e differenziazione neuronale.
• Subcellularmente, BCL6 si localizza esclusivamente nel nucleo, in linea con il suo ruolo di fattore di trascrizione legante il DNA.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione e acetilazione, e la proteina presenta un dominio N-terminale BTB/POZ e dita di zinco C-terminali, classificandola come un repressore trascrizionale a dita di zinco.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 235–350 (regione centrale al di fuori del dominio BTB), il che può produrre un anticorpo che riconosce entrambe le principali isoforme (72 kDa e 78 kDa); convalidare la specificità nel vostro tipo cellulare bersaglio.
• Poiché questo anticorpo è direttamente coniugato ad ABflo® 488, è adatto per la citometria a flusso intracellulare; ottimizzare i passaggi di fissazione e permeabilizzazione per il vostro bersaglio nucleare per garantire un'adeguata accessibilità dell'epitopo.
• Poiché BCL6 è espresso transitoriamente durante la differenziazione delle cellule B del centro germinativo, considerare l'uso di strategie di gating appropriate e co-colorazione con marcatori (es. CD38, CD20) per identificare cellule B del centro germinativo o cellule TFH in campioni umani.
• Confermare la reattività crociata con i vostri campioni, poiché la reattività documentata è limitata all'umano; eseguire una validazione aggiuntiva se si lavora con primati non umani o altre specie.

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