Anticorpo monoclonale coniglio anti-beta glucuronidasi (GUSB) per WB e ELISA - P08236

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della beta-glucuronidasi (GUSB)

• La beta-glucuronidasi (GUSB) è un enzima glicosidasi lisosomiale che catalizza l'idrolisi delle porzioni glucuronidiche dai glicosaminoglicani, svolgendo un ruolo essenziale nella degradazione dei solfati di dermatano e cheratano.
• Questa proteina è codificata dal gene GUSB, che dà origine a multiple isoforme attraverso splicing alternativo.
• GUSB è localizzata nel lisosoma, dove funziona nell'ambiente acido per scomporre carboidrati complessi.
• Come glicoproteina, GUSB subisce modifiche post-traduzionali inclusa la glicosilazione N-legata, che è critica per la sua attività enzimatica e il targeting lisosomiale.
• Le mutazioni nel gene GUSB sono associate alla mucopolisaccaridosi di tipo VII (MPS VII, sindrome di Sly), un disturbo di accumulo lisosomiale caratterizzato dall'accumulo di solfati di dermatano e cheratano.
• L'enzima è stato identificato attraverso sequenziamento proteico diretto e proteomica, confermando la sua presenza in molteplici tessuti.
• Il peso molecolare del proteoma di riferimento del precursore non elaborato è di circa 74,7 kDa, mentre la proteina matura migra a circa 75 kDa su SDS-PAGE.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre la regione N-terminale (amminoacidi 1–100). Per l'analisi Western blot, le condizioni denaturanti e riducenti sono tipicamente adatte per esporre questo epitopo lineare. Considerare l'utilizzo di un protocollo standard SDS-PAGE e trasferimento su membrana PVDF.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevamento. Si raccomanda di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il formato del saggio specifico.
• Poiché l'anticorpo è reattivo con GUSB umana, assicurarsi che i campioni siano di origine umana (es. linee cellulari, lisati tissutali). La reattività crociata con altre specie non è stata determinata, pertanto la validazione in sistemi non umani non è raccomandata senza verifica sperimentale.
• Il peso molecolare previsto di GUSB matura è ~75 kDa; una banda di questa dimensione dovrebbe essere osservata nel Western blot. Utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e considerare i controlli di carico.

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