Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Bif-1 per IF/ICC, ELISA - Q9Y371

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Bif-1

• L'endofolina-B1 (Bif-1, SH3GLB1) è una proteina di 41 kDa codificata dal gene SH3GLB1 nell'uomo, che esiste in due isoforme alternative con ruoli distinti: l'isoforma 1 promuove l'apoptosi, mentre l'isoforma 2 protegge la vitalità neuronale.
• Bif-1 svolge un ruolo critico nella dinamica della membrana esterna mitocondriale ed è necessaria per la morfologia e la funzione mitocondriali normali.
  Riferimenti bibliografici: PMID:15452144
• È un mediatore chiave dell'apoptosi dipendente dalle caspasi, promuovendo l'attivazione di BAX/BAK1, ed è anche coinvolta nella morte cellulare indipendente dalle caspasi durante la deprivazione di nutrienti.
  Riferimenti bibliografici: PMID:16227588
• Bif-1 attiva la lipide chinasi PIK3C3 (VPS34) durante l'autofagia associandosi al complesso PI3K II (PI3KC3-C2), regolando la formazione dell'autofagosoma e il traffico di ATG9A dall'apparato di Golgi.
  Riferimenti bibliografici: PMID:17891140 PMID:21068542
• Partecipa agli eventi di rimodellamento della membrana, inclusi la tubulazione e la frammentazione della membrana di Golgi, e può promuovere la fusione membranare reclutando proteine su membrane ad alta curvatura.
  Riferimenti bibliografici: PMID:11604418
• Subcellularmente, Bif-1 si localizza nel citoplasma, nell'apparato di Golgi, sulla membrana esterna mitocondriale, sulla membrana dell'autofagosoma e sul corpo centrale durante la citochinesi.
• L'espressione tissutale è più alta nel cuore, nel muscolo scheletrico, nel rene e nella placenta, con livelli più bassi nel cervello, nel colon, nel timo, nella milza, nel fegato, nell'intestino tenue, nei polmoni e nei leucociti del sangue periferico.
• Post-traduzionalmente, Bif-1 è soggetta ad acetilazione e fosforilazione; presenta un dominio SH3 e regioni a coil-coil fondamentali per le interazioni proteiche e l'associazione con la membrana.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per IF/ICC, utilizzare una fissazione appropriata (ad es. 4% PFA) e permeabilizzazione (ad es. 0,1% Triton X-100). Si consiglia di includere un passaggio di bloccaggio con BSA al 5% per ridurre il fondo.
• In ELISA, eseguire una serie di diluizioni (ad es. partendo da 1:500) per determinare la concentrazione ottimale dell'anticorpo per il tuo specifico sistema di rivestimento antigenico e di rilevazione.
• Validare la specificità dell'anticorpo in linee cellulari umane note per esprimere Bif-1, come HeLa o HEK293. Includere un controllo negativo (ad es. silenziamento mediante siRNA) per confermare il riconoscimento del bersaglio.
• Trattandosi di un anticorpo policlonale, tenere conto della potenziale variabilità tra lotti; si consiglia di qualificare ogni nuovo lotto nel tuo saggio.

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