Anticorpo Monoclonale Rabbit Anti-Bim per WB e ELISA - O43521

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Bim

• Bim (proteina 11 simile a Bcl-2, nota anche come mediatore dell'interazione con Bcl2 nella morte cellulare) è un membro pro-apoptotico della famiglia Bcl-2, codificato dal gene BCL2L11. Esistono più isoforme dovute allo splicing alternativo, tra cui BimEL, BimL, BimS e altre, con potenze apoptotiche diverse.
• Le isoforme BimL e BimS sono gli induttori di apoptosi e anoikis più potenti, mentre BimEL, Bim-alfa1/2/3 e Bim-gamma promuovono anche la morte cellulare ma con efficacia ridotta. Le isoforme BimAC e BimABC non possiedono attività apoptotica.
• Bim svolge un ruolo critico nell'apoptosi mediata dai mitocondri neutralizzando i membri anti-apoptotici della famiglia Bcl-2, facilitando il rilascio del citocromo c e l'attivazione delle caspasi.
• Subcellularmente, Bim si localizza principalmente nel sistema di endomembrane e nei mitocondri, in linea con la sua funzione nella regolazione dell'apoptosi.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e ubiquitinazione (coniugazione Ubl), che regolano la stabilità e l'attività di Bim. La struttura 3D della proteina è stata oggetto di studi.
• L'espressione tessuto-specifica varia: BimEL, BimL e BimS sono espressi ampiamente, mentre Bim-gamma è più abbondante nell'intestino tenue e nel colon, con livelli più bassi nella milza, nella prostata, nel testicolo, nel cuore, nel fegato e nei reni.
• Come regolatore chiave dell'apoptosi, Bim è coinvolto nello sviluppo, nell'omeostasi e in diverse patologie, tra cui il cancro e le malattie neurodegenerative.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1-100 della proteina Bim umana (O43521). Questa regione N-terminale è condivisa tra più isoforme, il che suggerisce che l'anticorpo possa rilevare diverse varianti di Bim. Confermare la specificità per l'isoforma di interesse nel proprio sistema sperimentale.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto dell'isoforma canonica di Bim è ~22 kDa (UniProt: 22.171 Da). Osservare i pattern di bande intorno a questa dimensione, tenendo conto di possibili isoforme alternative o modifiche post-traduzionali.
• L'anticorpo è stato convalidato per applicazioni ELISA e WB con reattività crociata verso campioni umani, mouse e ratto. Quando utilizzato in ELISA, ottimizzare le condizioni di coating e rilevamento per il vostro specifico formato di saggio.
• Poiché l'espressione di Bim può essere indotta da vari segnali di stress, utilizzare appropriati controlli positivi e negativi (ad esempio, cellule non trattate vs cellule in apoptosi) per convalidare le prestazioni dell'anticorpo.
• Per gli studi quantitativi, tenere presente che il turnover di Bim è regolato da fosforilazione e ubiquitinazione; l'intensità del segnale può variare in base al contesto cellulare.

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