Anticorpo policlonale di coniglio anti-Bim per IHC-P ed ELISA - O43521

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di Bim

• Bim (proteina 11 simile a Bcl-2) è un membro pro-apoptotico della famiglia di proteine Bcl-2 contenente esclusivamente il dominio BH3, codificato dal gene BCL2L11. Più isoforme (BimEL, BimL, BimS, Bim-alpha1, ecc.) vengono generate mediante splicing alternativo.
• Induce l'apoptosi e l'anoikis attraverso il suo dominio BH3, che si lega alle proteine Bcl-2 anti-apoptotiche e le neutralizza. L'isoforma BimL è più potente di BimEL, mentre BimS è la più potente. Anche le isoforme Bim-alpha1/2/3 inducono l'apoptosi, ma in modo meno efficiente, mentre BimAC e BimABC sono prive di attività apoptotica.
• È localizzata nel sistema endomembranoso e nella membrana mitocondriale esterna, dove media il rilascio del citocromo c attivando BAX/BAK.
• È ampiamente espressa; BimEL, BimL e BimS sono le isoforme predominanti e mostrano variazioni specifiche dei tessuti. L'isoforma Bim-gamma è più abbondante nell'intestino tenue e nel colon.
• È soggetta a modifiche post-traduzionali: la fosforilazione regola la stabilità della proteina e l'affinità di legame con i partner pro-sopravvivenza, mentre l'ubiquitinazione indirizza Bim alla degradazione proteasomiale.
• Gli studi strutturali evidenziano il ruolo critico dell'alfa-elica anfipatica BH3 nel legame al recettore e della coda idrofobica C-terminale nell'inserimento nella membrana.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 30–130 di Bim umano (NP_619527.1), una regione condivisa da più isoforme. Se necessario, confermare la specificità per l'isoforma.
• Per IHC-P, prendere in considerazione metodi standard di recupero antigenico (ad es., tampone citrato, pH 6,0) e validare la colorazione con controlli positivi appropriati (ad es., tessuto linfoide) e controlli negativi.
• Per ELISA, valutare la reattività verso l'immunogeno ricombinante a lunghezza intera o verso le proteine delle isoforme pertinenti e includere un controllo del legame aspecifico.
• La rilevazione mediante Western blot potrebbe essere possibile, ma non è garantita; in tal caso, tenere presente che il peso molecolare previsto delle isoforme Bim varia da circa 16 a 23 kDa e che l'espressione endogena può essere bassa nelle cellule non stimolate.

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