Anticorpo monoclonale anti-BiP/GRP78 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P11021

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di BiP/GRP78

• La chaperonina del reticolo endoplasmatico BiP, nota anche come GRP-78, proteina legante le immunoglobuline e HSPA5, è un membro della famiglia delle proteine da shock termico 70 (HSP70) codificata dal gene HSPA5.
• Funziona come chaperonina chiave del RE coinvolta nel ripiegamento e nel controllo di qualità delle proteine, facilitando il corretto ripiegamento e la degradazione delle proteine mal ripiegate attraverso l'interazione con DNAJC10/ERdj5. Riferimenti correlati: PMID:2294010, PMID:23769672, PMID:23990668
• Agisce come repressore della risposta alle proteine mal ripiegate (UPR), legando e inattivando EIF2AK3/PERK ed ERN1/IRE1 in condizioni non sottoposte a stress; l'accumulo di proteine mal ripiegate induce il rilascio di BiP, consentendo l'attivazione della UPR. Riferimenti correlati: PMID:11907036, PMID:1550958, PMID:19538957
• Svolge un ruolo ausiliario nel trasporto post-traduzionale di piccole proteine pre-secretorie attraverso la membrana del RE, probabilmente cooperando con SEC62 per modulare il canale del traslocone SEC61, e potrebbe essere coinvolta nell'apoptosi e nella proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:26045166
• Funziona come recettore cellulare per diversi flavivirus, tra cui il virus Dengue, il virus Zika e il virus dell'encefalite giapponese, mediandone il legame e l'ingresso nelle cellule ospiti. Riferimenti correlati: PMID:15098107, PMID:28053106, PMID:33432092
• Agisce come recettore per le proteine CotH espresse dai funghi dell'ordine Mucorales, facilitando l'invasione delle cellule epiteliali nella mucormicosi; interagisce specificamente con CotH3 di R. delemar nelle cellule epiteliali nasali durante la mucormicosi rino-orbitale/cerebrale. Riferimenti correlati: PMID:20484814, PMID:24355926, PMID:32487760
• Si localizza principalmente nel lume del reticolo endoplasmatico, ma viene rilevata anche nei melanosomi, nel citoplasma e sulla superficie cellulare, riflettendo i suoi diversi ruoli funzionali.
• È soggetta a numerose modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione, metilazione, nitrazione e ubiquitinazione, che possono regolarne l'attività chaperonica e le interazioni.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato da BiP/GRP78 umano; a causa dell'elevata omologia di sequenza, è prevista una reattività crociata con topo e ratto, che tuttavia deve essere convalidata nella specie target.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 72 kDa, sebbene le modifiche post-traduzionali o le condizioni sperimentali possano causare lievi variazioni di migrazione; includere controlli positivi appropriati e marcatori di peso molecolare.
• Per IHC-P e IF/ICC, ottimizzare le fasi di recupero antigenico e permeabilizzazione per rilevare BiP localizzata nel RE; valutare l'uso di controcolorazioni specifiche per il RE per confermare la localizzazione subcellulare.
• Nelle applicazioni ELISA, assicurarsi che le condizioni di rivestimento siano appropriate e testare diluizioni seriali dell'anticorpo per stabilire le concentrazioni di lavoro ottimali per il formato specifico del saggio.

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