Anticorpo Monoclonale Anti-BMAL1 per WB, ELISA - O00327

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BMAL1

• BMAL1 (Proteina ARNT-like a elica-ansa-elica basica 1) è un attivatore trascrizionale che forma un eterodimero con CLOCK o NPAS2 per attivare la trascrizione di geni contenenti elementi E-box, fungendo da componente positivo centrale dell'orologio circadiano.
• L'orologio molecolare circadiano consiste in anelli di retroazione trascrizione/traduzione interconnessi; gli eterodimeri CLOCK/NPAS2-BMAL1 attivano i geni period (PER) e criptocromo (CRY), i cui prodotti proteici reprimono l'attività di CLOCK/NPAS2-BMAL1, generando oscillazioni di circa 24 ore nell'espressione genica.
• L'eterodimero CLOCK-BMAL1 lega preferenzialmente il motivo E-box 5'-CACGTGA-3', con BMAL1 che riconosce il semi-sito 3' 5'-GTGA-3'; riconosce anche motivi non canonici 5'-AACGTGA-3' e 5'-CATGTGA-3'. Riferimenti correlati: PMID:23229515
• BMAL1 regola positivamente la miogenesi e negativamente l'adipogenesi tramite geni della via Wnt; nelle cellule beta pancreatiche, controlla la secrezione di insulina stimolata dal glucosio attraverso l'espressione genica antiossidante mediata da NRF2, e regola negativamente la segnalazione mTORC1.
• Promuove l'apertura ritmica della cromatina ed è essenziale per l'interazione ritmica di CLOCK con ASS1, regolando positivamente l'acetilazione di ASS1 mediata da CLOCK. Riferimenti correlati: PMID:28985504
• Ulteriori funzioni includono la regolazione della neurogenesi ippocampale adulta, il controllo diurno del metabolismo del muscolo scheletrico (tramite DGAT2 e COQ10B) e il reclutamento ritmico di monociti infiammatori Ly6C attraverso l'espressione di chemochine mediata da PRC2.
• Si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nei corpi PML; soggetto a modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione (formazione di legami isopeptidici).
• Altamente espresso nel cervello adulto, muscolo scheletrico, cuore e follicoli piliferi; implicato anche nella regolazione dell'ingresso e della replicazione di SARS-CoV-2 nelle cellule epiteliali polmonari.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 500–600 di BMAL1 umano; considerare che gli epitopi possono risiedere in regioni variabili o conservative. Validare la reattività incrociata tra specie nel proprio specifico contesto sperimentale.
• Per il Western blot (WB), il peso proteico previsto è ~69 kDa; verificare un'appropriata preparazione del campione e controlli di caricamento. La reattività di specie è confermata per umano, topo e ratto.
• Per applicazioni ELISA, ottimizzare l'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo utilizzando titolazioni a scacchiera standard. Notare che i dettagli del protocollo (ELISA diretto, indiretto, sandwich) devono essere stabiliti empiricamente.
• Data la natura circadiana dell'espressione di BMAL1, considerare gli effetti del momento della raccolta durante la progettazione degli esperimenti.

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