Anticorpo Policlonale Anti-BMAL1 per WB, ELISA - O00327

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BMAL1

• BMAL1 (ARNTL) è un fattore di trascrizione della famiglia elica-ansa-elica PAS che forma un componente centrale dell'orologio circadiano. Eterodimerizza con CLOCK o NPAS2 per guidare l'espressione dei geni dell'orologio e dei geni controllati dall'orologio attraverso elementi E-box, regolando i ritmi fisiologici giornalieri.
• L'eterodimero CLOCK-BMAL1 riconosce i motivi E-box canonici (5′-CACGTG-3′) e non canonici, con un motivo di legame preferito di 5′-CACGTGA-3′. BMAL1 si lega al semi-sito GTKA mentre CLOCK si lega a CAC (PubMed:23229515). Riferimenti correlati: PMID:23229515
• BMAL1 svolge un ruolo critico nell'apertura ritmica della cromatina, e il complesso BMAL1-CLOCK regola l'espressione circadiana di numerosi geni coinvolti nel metabolismo, inclusi SERPINE1, NAMPT, DBP e PPARGC1A, collegando l'orologio all'omeostasi metabolica.
• Oltre all'orologio centrale, BMAL1 ha funzioni specifiche dei tessuti: promuove la miogenesi rispetto all'adipogenesi tramite la segnalazione Wnt canonica, regola la funzione delle cellule β pancreatiche e la secrezione di insulina stimolata dal glucosio, controlla il traffico ritmico dei monociti e supporta la neurogenesi dell'ippocampo adulto.
• BMAL1 è soggetto a estese modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che modulano la sua stabilità, attività e durata del periodo. L'acetilazione mediata da CLOCK di ASS1 è dipendente da BMAL1 (PubMed:28985504). Riferimenti correlati: PMID:28985504
• A livello subcellulare, BMAL1 transita tra il nucleo e il citoplasma e si localizza nei corpi nucleari PML; è altamente espresso nel cervello, muscolo scheletrico, cuore e follicoli piliferi.
• Nel contesto dell'infezione, BMAL1 regola l'ingresso e la replicazione di SARS-CoV-2 nelle cellule epiteliali polmonari, probabilmente tramite modulazione post-trascrizionale di ACE2 e geni stimolati dall'interferone.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 380–510, una regione esterna ai domini bHLH e PAS; questa scelta può ridurre la reattività crociata con altre proteine bHLH-PAS e migliorare il rilevamento del BMAL1 a lunghezza intera.
• Per il Western blotting, dovrebbe essere osservata una banda attorno a 69 kDa negli estratti cellulari umani, di topo e di ratto (es. HeLa, cervello di topo, fegato di ratto). Utilizzare controlli di carico appropriati e considerare l'estrazione nucleare per arricchire il segnale.
• Per le applicazioni ELISA, ottimizzare la concentrazione di rivestimento dell'immunogeno ricombinante o della proteina nativa e validare la specificità utilizzando saggi di competizione o modelli knockout.
• È prevista la reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, si consiglia l'allineamento della sequenza della regione immunogenica tra le specie per confermare la conservazione dell'epitopo.

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