Anticorpo Policlonale Anti-Bmi1 per WB, IF/ICC, ELISA - P35226

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Bmi1

• La proteina BMI-1 del complesso Polycomb (nota anche come PCGF4, RNF51) è un componente centrale del complesso repressivo Polycomb 1 (PRC1), che mantiene la repressione trascrizionale di geni chiave dello sviluppo, inclusi i cluster Hox, attraverso il rimodellamento della cromatina e le modificazioni degli istoni.
• All'interno del complesso PRC1, BMI-1 collabora con RNF2/RING2 per catalizzare la monoubiquitinazione dell'istone H2A alla Lis-119 (H2AK119ub), un marcatore epigenetico critico per il silenziamento genico stabile. Riferimenti correlati: PMID:15386022, PMID:16359901, PMID:16714294
• Il complesso ternario RNF2-UB2D3-BMI1 si lega specificamente ai nucleosomi ed esercita la sua attività di ligasi E3 dell'ubiquitina esclusivamente sull'istone H2A nucleosomale, evidenziando la sua funzione mirata alla cromatina. Riferimenti correlati: PMID:21772249, PMID:25355358
• BMI-1 agisce come regolatore positivo dell'attività di ligasi dell'ubiquitina di RNF2, potenziando così l'ubiquitinazione dell'H2A mediata da PRC1 e rafforzando la repressione trascrizionale mediata da polycomb. Riferimenti correlati: PMID:21772249, PMID:26151332
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare, in linea con il suo ruolo nella regolazione della cromatina, sebbene sia stata osservata anche una distribuzione citoplasmatica in determinate condizioni (UniProt: LOCALIZZAZIONE SUBCELLULARE).
• BMI-1 è classificata come un proto-oncogene e regolatore della cromatina, caratterizzata da un dominio dito di zinco RING che coordina ioni zinco essenziali per la sua integrità strutturale e funzione (UniProt: PAROLE CHIAVE).

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 120-326 di BMI-1 umana, una regione centrale che può produrre anticorpi che riconoscono molteplici conformazioni o stati di interazione; convalidare la specificità nel sistema di campioni rilevante.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 37 kDa; considerare l'uso di un controllo di caricamento di dimensioni simili e ottimizzare le condizioni di lisi per preservare l'integrità proteica.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, i protocolli di fissazione e permeabilizzazione possono influenzare l'accessibilità dell'antigene; testare metodi diversi (es. metanolo vs. formaldeide) può migliorare la colorazione nucleare.
• Le prestazioni in ELISA possono essere verificate utilizzando l'immunogeno ricombinante come controllo positivo; includere appropriati controlli negativi per valutare il legame aspecifico.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti dovrebbe essere monitorata quando si passa da un lotto all'altro, e potrebbe essere necessaria una ri-ottimizzazione dei fattori di diluizione.

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