Anticorpo policlonale anti-Bmi1 per WB, IP, ELISA - P35226

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Bmi1

• Bmi1 (PCGF4/RNF51) è un componente centrale dei complessi simili al complesso repressivo Polycomb 1 (PRC1), essenziali per mantenere lo stato di repressione trascrizionale di molti geni dello sviluppo, inclusi i cluster di geni Hox.
• Il complesso PRC1 media la monoubiquitinazione dell'istone H2A in corrispondenza della Lisina-119, un marcatore epigenetico che altera ereditariamente l'esprimibilità della cromatina.
  Riferimenti correlati: PMID:15386022, PMID:16359901, PMID:16714294
• All'interno del complesso simile al PRC1, Bmi1 stimola specificamente l'attività di ubiquitina-proteina ligasi E3 di RNF2/RING2 verso l'istone H2A nucleosomale.
  Riferimenti correlati: PMID:15386022, PMID:21772249, PMID:26151332
• Un complesso attivo minimo composto da RNF2, l'enzima ubiquitina coniugante UB2D3 e Bmi1 si lega ai nucleosomi e mostra specificità per il substrato esclusivamente per l'istone H2A nucleosomale.
  Riferimenti correlati: PMID:21772249, PMID:25355358
• Bmi1 localizza prevalentemente nel nucleo ma si trova anche nel citoplasma, a conferma delle sue funzioni di modifica della cromatina e di possibili altri ruoli extranucleari.
• Come membro della famiglia delle proteine a dito di RING del gruppo Polycomb, Bmi1 contiene un dominio a dito di zinco ed è classificato come proto-oncogene, a sottolineare la sua importanza nella proliferazione cellulare e nel mantenimento delle cellule staminali.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide C-terminale (amminoacidi 200–300) di Bmi1 umano; si consiglia di verificare la specificità con campioni trattati con knockout o siRNA.
• Nel Western blotting, il peso molecolare atteso è di circa 37 kDa; ottimizzare il bloccaggio e la diluizione dell'anticorpo utilizzando lisati di controllo positivo (es. HeLa, HEK293T).
• Per l'immunoprecipitazione, l'anticorpo può co-precipitare i componenti interagenti del PRC1; includere controlli isotipici e validare le condizioni di co-IP.
• Le prestazioni in ELISA devono essere valutate confrontando il segnale con campioni di controllo noti positivi e negativi per Bmi1.
• A causa della natura policlonale, è possibile una variabilità da lotto a lotto; titolare l'anticorpo individualmente e confermare la reattività crociata nei modelli di topo/ratto con controlli appropriati.

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