Anticorpo policlonale coniglio anti-BPI per WB, ELISA - P17213

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del BPI

• La proteina battericida aumentatrice della permeabilità (BPI) è una glicoproteina secreta di 53,9 kDa appartenente alla superfamiglia BPI/LBP/Plunc, nota anche come CAP 57. È codificata dal gene BPI nell'uomo.
• Il BPI esercita una potente attività antimicrobica selettivamente contro molti batteri Gram-negativi legandosi con alta affinità ai lipopolisaccaridi (LPS) nella membrana esterna batterica, portando alla permeabilizzazione della membrana e alla morte del batterio.
• Specificamente, il BPI ricombinante dimostra attività antibatterica contro Pseudomonas aeruginosa e questa attività è neutralizzata da un eccesso di LPS dello stesso organismo, confermando il targeting dipendente da LPS.
• La proteina si localizza principalmente alla membrana dei granuli citoplasmatici nelle cellule mieloidi e viene secreta dopo l'attivazione dei neutrofili, svolgendo un ruolo critico nella difesa immunitaria innata.
• L'espressione tissutale è limitata alle cellule della linea mieloide, inclusi i neutrofili e i monociti, coerente con la sua funzione nella difesa dell'ospite precoce contro l'infezione batterica.
• Le modifiche post-traduzionali includono la formazione di legami disolfuro e la glicosilazione, come indicato dalle parole chiave UniProt, che sono probabilmente importanti per la stabilità strutturale e l'attività.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 248–487 all'interno della regione C-terminale del BPI umano. Questa regione è distinta dal dominio di legame del LPS N-terminale, permettendo potenzialmente il riconoscimento sia del BPI a lunghezza intera che dei frammenti C-terminali.
• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di condizioni ridotte e non ridotte per valutare la migrazione dipendente dai legami disolfuro, poiché il BPI contiene più legami disolfuro che possono influenzare il peso molecolare apparente.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere adatto per rilevare il BPI nativo o ricombinante in soluzione; tuttavia, le condizioni di rivestimento ottimali e le diluizioni dell'anticorpo dovrebbero essere determinate empiricamente.
• Data l'espressione limitata alla linea mieloide, validare la specificità dell'anticorpo in pertinenti linee cellulari di controllo positivo (es. HL-60 differenziate o neutrofili primari) e includere controlli knockout o peptidi di blocco dove possibile.
• La reattività crociata con il BPI del mouse (prevista) dovrebbe essere confermata sperimentalmente nel sistema di campione target, poiché l'omologia di sequenza nella regione immunogenica può variare.

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