Anticorpo policlonale coniglio anti-BRD2 per WB, ELISA - P25440

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di BRD2

• BRD2 (Proteina 2 contenente il dominio bromo), nota anche come O27.1.1, è un membro della famiglia BET (bromodomain and extra-terminal), caratterizzata da due domini bromo N-terminali e un dominio extra-terminale. È codificata dal gene umano BRD2 (Gene ID: 6046).
• Funziona come lettore della cromatina che riconosce e si lega specificamente all'istone H4 acetilata alla Lys-5 e alla Lys-12 (H4K5ac e H4K12ac), controllando così l'espressione genica e il rimodellamento della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:17148447 PMID:17848202 PMID:18406326
• Gioca un ruolo chiave nella compartimentazione del genoma associandosi con CTCF e coesina; viene reclutato sulla cromatina da CTCF e promuove la formazione di domini di associazione topologica (TAD), contribuendo alla formazione dei confini e all'isolamento degli enhancer. Riferimenti correlati: PMID:35410381
• Recluta fattori di trascrizione e coattivatori sui siti dei geni bersaglio e attiva la macchinaria della RNA polimerasi II per l'allungamento trascrizionale. Si lega anche a proteine non istoniche acetilate, come STAT3 acetilata alla Lys-87, promuovendo il reclutamento di STAT3 sulla cromatina. Riferimenti correlati: PMID:28262505
• È coinvolto nella risposta infiammatoria regolando la differenziazione delle cellule T CD4+ naive in cellule T-helper Th17, mediata attraverso il riconoscimento di STAT3 acetilata. Riferimenti correlati: PMID:28262505
• Oltre alle lisine acetilate, BRD2 riconosce i residui di lisina sugli istoni che sono sia metilati che acetilati (N6-acetil-N6-metillisina, Kacme), un marchio epigenetico di cromatina attiva. Si lega specificamente all'istone H4 acetil-metilata alla Lys-5 e Lys-12 (H4K5acme e H4K12acme). Riferimenti correlati: PMID:37731000
• Si localizza nel nucleo e si associa ai cromosomi. Annotata con parole chiave tra cui splicing alternativo, dominio bromo, regolatore della cromatina, interazione ospite-virus e regolazione della trascrizione.
• Ha un peso molecolare calcolato di circa 88 kDa, coerente con la banda osservata di ~88 kDa nei western blot.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) del BRD2 umano, che include il primo dominio bromo; questa regione è altamente conservata, quindi considerare la reattività crociata con altri membri della famiglia BET (BRD3, BRD4, BRDT) quando si interpretano i risultati in specie con sequenze simili.
• Per il western blot, è prevista una banda a ~88 kDa nei lisati cellulari umani; si consiglia di ottimizzare la diluzione dell'anticorpo e utilizzare estratti nucleari per arricchire la proteina bersaglio.
• La validazione ELISA è stata eseguita; per il rilevamento quantitativo, considerare l'abbinamento con un anticorpo di cattura per sviluppare un ELISA a sandwich e validare la linearità e la sensibilità nella matrice specifica del campione.
• L'anticorpo è sviluppato nel coniglio; utilizzare anticorpi secondari anti-coniglio appropriati per il rilevamento senza reattività crociata con IgG di altre specie in saggi multiplex.

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