Anticorpo monoclonale di coniglio anti-BRD4 per WB, IHC-P, ELISA - O60885

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della BRD4

• BRD4 (proteina 4 contenente bromodominio, nota anche come HUNK1) è una proteina lettrice della cromatina che riconosce gli istoni acetilati, svolgendo un ruolo chiave nella trasmissione della memoria epigenetica tra le divisioni cellulari.
  Riferimenti correlati:
  PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504
• Rimane associata alla cromatina acetilata per tutto il ciclo cellulare per preservarne lo stato e mantenere la struttura di ordine superiore, fornendo memoria per la trascrizione genica postmitotica.
  Riferimenti correlati:
  PMID:22334664 PMID:23317504 PMID:23589332
• Durante l'interfase, BRD4 regola la trascrizione genica indotta da segnali reclutando il complesso P-TEFb su promotori e enhancer distali, collaborando con JMJD6 per attivare P-TEFb e promuovere la fosforilazione del CTD della RNA polimerasi II.
  Riferimenti correlati:
  PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240
• BRD4 promuove anche la fosforilazione della 'Ser-2' del CTD della RNA polimerasi II, sia tramite il reclutamento di P-TEFb sia tramite una riportata attività chinasi intrinseca che richiede ulteriori evidenze in vivo.
  Riferimenti correlati:
  PMID:23086925 PMID:22509028
• Riconosce la RELA acetilata, potenziando l'attivazione trascrizionale di NF-kappa-B reclutando il complesso P-TEFb.
  Riferimenti correlati:
  PMID:19103749
• BRD4 funziona come isolatore cromatinico nella risposta al danno del DNA, reclutando il complesso condensin-2 sugli istoni acetilati e limitando la diffusione della fosforilazione di H2AX.
• Subcellulare, BRD4 si localizza nel nucleo e si associa ai cromosomi.
• È espressa ubiquitaria in tutti i tessuti ed è soggetta a modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione e acetilazione; contiene bromodomini ed è implicata nelle interazioni ospite-virus e in varianti patologiche.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico compreso tra gli amminoacidi 100–200 della BRD4 umana, quindi l'anticorpo può riconoscere un epitopo in questa regione N-terminale.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di ~152 kDa; si consiglia di utilizzare una percentuale di gel adeguata e tempi di trasferimento prolungati per proteine di così alto peso molecolare. Eseguire sempre la validazione con controlli positivi e negativi nel sistema di campioni di tuo interesse.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato o EDTA, indotto dal calore) possono essere ottimizzate per il tuo specifico tipo di tessuto. Poiché BRD4 è espressa ubiquitaria, includi sempre controlli tessutali adeguati.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; si consiglia di abbinarlo con anticorpi appropriati e di validarlo con proteina BRD4 ricombinante o lisati cellulari.

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