Anticorpo policlonale Anti-BRG1/SMARCA4 per WB, IF/ICC, ELISA - P51532

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di BRG1/SMARCA4

• SMARCA4 (BRG1) è il regolatore della cromatina, dipendente da actina, associato alla matrice correlato a SWI/SNF, sottofamiglia A membro 4, anche noto come BAF190A, proteina BRG-1, SNF2-beta e attivatore trascrizionale BRG1.
• Agisce come rimodellatore della cromatina dipendente da ATP, modificando i contatti tra DNA e istoni per regolare la trascrizione di geni specifici. Riferimenti correlati: PMID:15075294, PMID:29374058, PMID:30339381
• Componente principale dei complessi di rimodellamento della cromatina SWI/SNF; nello sviluppo neurale, partecipa ai complessi npBAF e nBAF con scambio di subunità durante la differenziazione.
• Funziona come corepressore di ZEB1 per regolare la trascrizione della E-caderina ed è richiesto per la transizione epitelio-mesenchimale (EMT) indotta da TGF-beta. Riferimenti correlati: PMID:20418909
• Si localizza nel nucleo, dove si associa alla cromatina e svolge la sua funzione di rimodellamento.
• Colocalizza con ZEB1 nelle cellule negative per E-caderina di linee stabilite, nello stroma del colon normale e sul fronte di invasione dei carcinomi colorettali.
• È soggetto ad acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione; possiede domini bromodominio e ATPasi, con attività di legame all'RNA.
• Le parole chiave indicano il coinvolgimento in sordità e disabilità intellettiva (varianti patologiche) e la proteina va incontro a splicing alternativo.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione N-terminale (aa 30-130) di SMARCA4 umano; questa regione è relativamente conservata e può rilevare più isoforme o membri correlati della famiglia.
• Considerato l'elevato peso molecolare (185 kDa), utilizzare un gel SDS-PAGE con il 6–8% di poliacrilammide per una separazione ottimale nel western blotting; si raccomanda un trasferimento a bassa tensione per un tempo prolungato.
• Per immunofluorescenza/ICC, considerare la permeabilizzazione nucleare e una colorazione nucleare di contrasto per confermare la localizzazione; l'arricchimento di frazioni nucleari può aumentare il segnale.
• Validare la specificità dell'anticorpo nel sistema cellulare o tissutale di riferimento, specialmente se si prevede reattività incrociata con altre specie, poiché i dati ufficiali di reattività incrociata sono limitati all'uomo.
• La performance nell'ELISA può dipendere dalla conformazione dell'antigene; si può valutare un formato competitivo o sandwich utilizzando il peptide immunogeno come standard.

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