Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-BRIP1 per WB ed ELISA - Q9BX63

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BRIP1

• BRIP1 codifica per la proteina del gruppo J dell'anemia di Fanconi (FANCJ), nota anche come elicasi associata al C-terminale di BRCA1 (BACH1) e proteina 1 interagente con BRCA1. Appartiene alla famiglia delle elicasi DEAH e contiene un dominio cluster ferro-zolfo 4Fe-4S critico per la sua attività elicasica.
• Funziona come un'ATPasi DNA-dipendente ed elicasi DNA 5'-3' che mantiene la stabilità cromosomica risolvendo strutture secondarie del DNA durante la replicazione e la riparazione. Riferimenti correlati: PMID:11301010 PMID:14983014 PMID:16116421
• Svolge un ruolo chiave nella via dell'anemia di Fanconi (FA), agendo a valle dell'ubiquitinazione di FANCD2 per riparare i crosslink intercatena del DNA. Facilita la riparazione per ricombinazione omologa delle rotture del doppio filamento di DNA attraverso la sua interazione con BRCA1. Riferimenti correlati: PMID:14983014 PMID:16153896
• Rimuove i crosslink DNA-proteina associati a siti abasici alle forcelle di replicazione mediante lo svolgimento guidato dall'elicas degli addotti HMCES, consentendo il taglio mediato da SPRTN e la risoluzione della lesione. Riferimenti correlati: PMID:16116421 PMID:36608669
• Scioglie ibridi RNA:DNA e strutture di DNA G-quadruplex (G4); lo svolgimento del G4 richiede una coda di DNA a singolo filamento 5', indicando una specificità per substrati associati alla replicazione. Riferimenti correlati: PMID:14983014 PMID:18426915 PMID:20639400
• Si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, con espressione ubiquitaria e livelli più alti nel testicolo. Subisce modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione e acetilazione, e mutazioni in BRIP1 sono associate all'anemia di Fanconi e alla predisposizione al cancro.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai 260 amminoacidi N-terminali di BRIP1, che possono riconoscere isoforme a lunghezza intera e potenziali isoforme N-terminali. Verificare la specificità utilizzando controlli appropriati o modelli knockdown/knockout.
• Per il Western blotting, BRIP1 ha un peso molecolare previsto di ~141 kDa. Ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare e caricare una quantità sufficiente di proteina (ad es. 30–50 µg di estratto nucleare) a causa della tipicamente bassa espressione endogena.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare la proteina BRIP1 ricombinante (ad es. il frammento immunogeno) come antigene di ricoprimento positivo e validare la linearità/intervallo dinamico con diluizioni seriali.
• Agenti dannosi per il DNA (ad es. mitomicina C o cisplatino) possono aumentare l'espressione di BRIP1 o alterarne la localizzazione subcellulare; considerare il pretrattamento delle cellule per migliorare il rilevamento.

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